经典型霍奇金淋巴瘤细胞（L428）

经典型霍奇金淋巴瘤细胞(L428)
细胞特性
1)来源：淋巴，淋巴瘤
2)形态：圆形，悬浮生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
细胞接受后的处理：
1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2.请【qǐng】先在显微【wēi】镜下确认细胞生长状态，去掉封口膜并将T25瓶置于【yú】37°C培【péi】养约2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4. 如果细【xì】胞长满【mǎn】（90%以上【shàng】）请及时进行【háng】细胞传代，传【chuán】代培养用【yòng】6ml本公司附带的*培养【yǎng】基。
5.接到【dào】细胞次日【rì】，请【qǐng】检查细【xì】胞是否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我【wǒ】们取【qǔ】得电联【lián】。
 
经典型霍奇金淋巴瘤细胞(L428)细胞用途：仅供使用。
本公司的细胞培养操作规程，供参考
1)培养基及培养冻存条件准备：
准备 RPIVM-1640 培养基(RPMI-1640:GIBC)，90%;胎牛血清，10%。
培【péi】养条件：气相：空气，95%;二氧化碳，5%。温度：37°C，培养箱【xiāng】湿【shī】度为 70%-80%。冻存【cún】液：90%血清【qīng】，10%DMSO，现用现配。液【yè】氮储存。
 
2)细胞处理：
复【fù】苏细胞：将【jiāng】含有lmL细胞悬液的冻【dòng】存管迅【xùn】速放入【rù】37°C水【shuǐ】浴中（水面要低于【yú】冻存管盖部）摇【yáo】晃解冻，移入事先准备【bèi】好的含有4mL培养基的15ml离【lí】心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分【fèn】钟，弃去上清液，加入lmL培养基后吹【chuī】匀。然后将所有细胞悬【xuán】液移【yí】入含有【yǒu】5ml培【péi】养基【jī】的培养瓶中培养过夜。第【dì】二天换【huàn】液并检查细胞【bāo】密度。细【xì】胞【bāo】传代【dài】：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养【yǎng】。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方【fāng】法一：收集细胞，1000RPM，常温条【tiáo】件下离心【xīn】5分钟，弃【qì】去上【shàng】清液【yè】，补加【jiā】l-2mL培养液后吹句，将细【xì】胞悬液按1: 2到1: 5的比例分到新的【de】含8ml培养基的新皿中【zhōng】或者【zhě】瓶中。
方【fāng】法二：可选【xuǎn】择半数换液方【fāng】式，弃去【qù】半数培养【yǎng】基后，将剩【shèng】余细【xì】胞悬起，将细胞【bāo】悬液按1: 2到【dào】1: 3的比例分到新的含8ml培养【yǎng】基的新【xīn】皿中或者瓶中。细胞冻【dòng】存：待细胞生长状态良好时，可进【jìn】行细胞冻存【cún】。悬浮【fú】细胞【bāo】冻存【cún】时【shí】，应【yīng】将细【xì】胞收集，1000RPM，常温条【tiáo】件下离心5分钟，少量保存上清液（防止细胞吸【xī】走)，加入部分新【xīn】鲜培养基，吹打均【jun1】匀后，加【jiā】入到冻存管中，在冻【dòng】存【cún】管中加入10%DMSO摇匀【yún】后进行冻存。
 
经典型霍奇金淋巴瘤细胞(L428)注意事项：
收到【dào】细胞后，若发【fā】现干【gàn】冰己挥发【fā】干净、冻存管瓶盖脱落、破损【sǔn】及细胞【bāo】有污【wū】染，请【qǐng】立即与我们电联。
所有动物细胞均视为有潜在的生【shēng】物危害性，必须在二级生【shēng】物【wù】安全台内操【cāo】作，并请注意防护，所【suǒ】有【yǒu】废液及接触【chù】过此细【xì】胞【bāo】的器皿需要【yào】灭菌后方【fāng】能【néng】丢弃。