绒猴EBV转化的白细胞（B95-8）

绒猴EBV转化的白细胞(B95-8)
细胞介绍
B95-8细胞【bāo】株源自暴露于【yú】人白血球中【zhōng】抽提的EB病毒的绒猴白血【xuè】球。B95-8是一个连续株并释放高滴【dī】度的【de】转染EB病毒。此细胞【bāo】株提供EB病【bìng】毒用于【yú】建立人的连续淋巴细胞株【zhū】。
 
细胞特性
1)来源：外周血淋巴细胞
2)形态：淋巴母细胞样，悬浮生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装细胞接受后的处理：
1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2.请先在显微镜下确认细胞生长状【zhuàng】态，去掉封口膜并将【jiāng】T25瓶置于【yú】37°C培【péi】养2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4. 如果细【xì】胞【bāo】长满（90%以【yǐ】上）请及时进行细胞传代，传代培【péi】养用6ml本公【gōng】司附【fù】带的【de】*培养基。
5.接到细【xì】胞次日，请检【jiǎn】查细胞是否污染，若发现污染或【huò】疑【yí】似污染，请及【jí】时与【yǔ】我们【men】取【qǔ】得电联。
 
绒猴EBV转化的白细胞(B95-8)细胞用途：仅供使用。
本公司的细胞培养操作规程，供参考
1)培养基及培养冻存条件准备：
准备 RPIVM-1640 培养基(RPMI-1640: GIBCO)，90%;胎牛【niú】血清，10%。
培养条件：气【qì】相：空气，95%;二氧化碳，5%。温度：37°C，培【péi】养箱【xiāng】湿度【dù】为 70%-80%。
冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
2)细胞处理：
复【fù】苏细胞：将含有lmL细胞悬液的冻【dòng】存管迅【xùn】速放入37°C水浴中（水【shuǐ】面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先【xiān】准备好的含有4mL培【péi】养基的15ml离心管【guǎn】中混合均匀。在1000RPM条件下【xià】离心4分钟【zhōng】，弃去上清液，加入lmL培【péi】
养基后吹【chuī】匀。然后将所有细胞悬【xuán】液移【yí】入含【hán】有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并【bìng】检查【chá】细【xì】胞密【mì】度。细【xì】胞传代：如果【guǒ】细胞密度达80%-90%，即【jí】可进行传代培养【yǎng】。对于悬浮细胞，传代可参【cān】考以下方法：
方法【fǎ】一：收集细胞，1000RPM，常温条件【jiàn】下离心5分【fèn】钟【zhōng】，弃去【qù】上清【qīng】液【yè】，补加l-2mL培养【yǎng】液后吹句，将细胞悬液按1: 2到1: 5的比例分到【dào】新的含8ml培养基的【de】新皿中或者瓶中。
方法二【èr】：可选【xuǎn】择半数【shù】换液【yè】方【fāng】式，弃去半【bàn】数培养基后【hòu】，将剩余细胞悬起【qǐ】，将细胞【bāo】悬液【yè】按1: 2到1: 3的比例分【fèn】到【dào】新的含8ml培养基的【de】新皿中或者瓶中。细胞【bāo】冻【dòng】存【cún】：待细胞生长状态【tài】良好时，可进行【háng】细胞冻存。悬浮细胞冻存时【shí】，应【yīng】将收集，1000RPM，常温条件下离心5分钟，少量保存上【shàng】清液（防止细胞吸走)，加【jiā】入部分新鲜培【péi】养基【jī】，吹打均匀【yún】后，加入到冻存管中【zhōng】，在冻【dòng】存管中加入10%DMSO摇匀后【hòu】进行冻【dòng】存。
 
绒猴EBV转化的白细胞(B95-8)注意事项：
收到细【xì】胞【bāo】后，若发现干冰己挥发【fā】干净、冻存【cún】管瓶盖脱落、破损及细【xì】胞有【yǒu】污染，请立即与我们电联。
所有动【dòng】物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生【shēng】物【wù】安【ān】全台内操作，并请注意防护【hù】，所有【yǒu】废液及接触过此细【xì】胞的【de】器皿需要灭【miè】菌【jun1】后方能丢【diū】弃。