仓鼠卵巢细胞亚株（CHO-K1）

仓鼠卵巢细胞亚株(CHO-K1)
细胞介绍
该【gāi】细胞株是源自【zì】成年中国仓鼠【shǔ】卵巢深入活体组织切片的 CHO 细【xì】胞的亚克【kè】隆【lóng】。
 
细胞特性
1  来源：仓鼠卵巢
2  形态 ：上皮细胞样
3  含量：>1x10 6 个/mL
4  污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5  规格：T25 瓶或者 1mL 冻【dòng】存管包装运【yùn】输和保【bǎo】存：使用含有【yǒu】胎牛血清的【de】 2ml 冻存管发【fā】送存活细【xì】胞。收到细【xì】胞后【hòu】，可在 1000RPM，常温条件下【xià】，离心 5min 后，于洁净【jìng】操作台弃去上清【qīng】，加入推荐使用的培养基后转移至10cm 培【péi】养皿或者【zhě】 T25 培养【yǎng】瓶中【zhōng】培养，传代【dài】达到细胞生长状态良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
 
仓鼠卵巢细胞亚株(CHO-K1)细胞用途：仅供使用。
细胞培养步骤
一． 培养基 及 培养 冻存 条件准备：
1）准【zhǔn】备 F-12K 培养基【jī】（F-12K ：GIBCO），90%；胎【tāi】牛血清【qīng】，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧【yǎng】化【huà】碳，5%。 温度：37 摄【shè】氏【shì】度，培养箱【xiāng】湿度为 70%-80%。
3）冻存液【yè】：90%*培【péi】养基，10%DMSO，现【xiàn】用【yòng】现配。液氮储存。
二． 细胞 处理 ：
1） 复苏细胞【bāo】：将含有 1mL 细胞悬液的【de】冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃【huǎng】解冻，加入 4mL 培养基混合【hé】均匀。在 1000RPM 条件【jiàn】下离心 4 分钟【zhōng】，弃去上【shàng】清液【yè】，补【bǔ】加 1-2mL 培养基后吹匀。然后【hòu】将所有细【xì】胞【bāo】悬液加入培养瓶【píng】中【zhōng】培养（或【huò】将细胞悬液【yè】加入 10cm 皿中，加【jiā】入约 8ml 培养基，培【péi】养过夜【yè】）。第二天换【huàn】液【yè】并检【jiǎn】查细胞【bāo】密度。
2） 细胞传代：如果细胞密【mì】度【dù】达 80%-90%，即可进行传【chuán】代培养。对于贴【tiē】壁【bì】细胞，传代【dài】可【kě】参考以下方法：
1. 弃去培养【yǎng】上【shàng】清，用不含【hán】钙、镁【měi】离子的 PBS 润洗细胞【bāo】 9-21 次。
2. 加 2ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中【zhōng】，置于【yú】 37℃培养【yǎng】箱中【zhōng】消化 9-21 分【fèn】钟，然后在显微镜下观【guān】察细胞【bāo】消化情况，若细胞大【dà】部分变圆并脱【tuō】落，迅速拿【ná】回操作【zuò】台【tái】，轻敲几下培【péi】养瓶后加少量培养基终【zhōng】止【zhǐ】消化。
3. 按 6-8ml/瓶补加【jiā】培养基，轻轻打【dǎ】匀后吸【xī】出，在 1000RPM 条件下【xià】离心 4 分【fèn】钟，弃去上清【qīng】液，补加 1-2mL 培养液【yè】后吹匀。
4. 将细胞【bāo】悬液按 1：2 到 1：5 的比例【lì】分到新的含【hán】 8ml 培养基【jī】的新皿中或者瓶【píng】中。
3）细胞冻存：待【dài】细胞【bāo】生长状态【tài】良好时，可进行细【xì】胞冻存。贴壁细胞冻存【cún】时，弃去培养【yǎng】基后加入少量胰酶，细胞变圆【yuán】脱落后，加【jiā】入【rù】约 1ml 含血清的培养【yǎng】基后加【jiā】入冻存管【guǎn】中，再添加 10%DMSO 后进行冻存。
 
仓鼠卵巢细胞亚株(CHO-K1)注意事项：
1. 收到【dào】细胞后，若发现干冰已挥发干【gàn】净【jìng】、冻【dòng】存管瓶【píng】盖脱落、破损及细胞有污染，请立【lì】即与我们电联。
2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必【bì】须在二级【jí】生物安【ān】全台内操【cāo】作，并【bìng】请注意防护，所【suǒ】有废液及接【jiē】触过此细【xì】胞【bāo】的器皿需要【yào】灭菌后方能【néng】丢弃。