非小细胞肺癌细胞（H1792）

非小细胞肺癌细胞(H1792)
细胞特性
1)来源：肺癌
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
细胞接受后的处理：
1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2.请先【xiān】在显微镜下确【què】认细胞生【shēng】长状态，去掉封口【kǒu】膜并将T25瓶置【zhì】于37°C培养【yǎng】约【yuē】2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4. 如果【guǒ】细胞【bāo】长满（90%以上）请【qǐng】及时进行细胞【bāo】传【chuán】代，传代培【péi】养用6ml本公司【sī】附带的*培养基【jī】。
5.接到细胞次日，请检查【chá】细胞是否【fǒu】污染，若发现污【wū】染或疑似污染，请及时【shí】与【yǔ】我们取得电联。
 
非小细胞肺癌细胞(H1792)细胞用途：仅供使用。
本公司的细胞培养操作规程，供参考
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 RPIVM-1640 培养基【jī】（RPMI-1640，GIBCO)，90%;胎牛血清【qīng】，10%。
2.培养条件：气相：空气【qì】，95%;二氧化碳【tàn】，5%。温度：37°C，培【péi】养箱湿度为 70%-80%。
3.冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏细胞：将含有lmL细胞悬液的冻存管迅速【sù】放入37°C水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准【zhǔn】备好【hǎo】的含有4mL培养基【jī】的15ml离心【xīn】管中混合均【jun1】匀。在1000RPM条件【jiàn】下离【lí】心4分钟【zhōng】，弃去【qù】上清液，加入lmL培养【yǎng】基后吹匀【yún】。然【rán】后将所有细【xì】胞【bāo】悬液移入含【hán】有5ml培养【yǎng】基的培养【yǎng】瓶【píng】中【zhōng】培养过夜。
第二天换液并检查细胞密度。
细胞传代：如果【guǒ】细胞密度【dù】达80%-90%，即可进行传代培养。对于贴壁细【xì】胞，传代可参考以下方法【fǎ】：弃【qì】去培【péi】养上清，用不【bú】含钙【gài】、镁离子的PBS润洗【xǐ】细胞【bāo】9-21次【cì】。力口 2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶【píng】中【zhōng】，置于37°C培养箱中【zhōng】消化9-21分钟，然后在显微镜下观察【chá】细胞消化情【qíng】况，若细胞大部分变【biàn】圆并脱【tuō】落【luò】，迅速拿回【huí】操【cāo】作台，轻敲几下【xià】培养瓶后加入3ml此细胞的培【péi】养基【jī】终止消【xiāo】化。轻轻吹打后吸【xī】出，移【yí】入15ml离心【xīn】管【guǎn】中，在1000RPM条件下【xià】离心4分【fèn】钟，弃去上【shàng】清液，加入lmL培【péi】养液后吹匀【yún】。移入【rù】到事先准备好的含【hán】有【yǒu】5ml培养基的T-25培养【yǎng】瓶中或【huò】含有14ml培基的T-75培【péi】养瓶中培养。细胞冻存：待细胞生长【zhǎng】状态【tài】良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，先要消化【huà】处理【lǐ】并进行细胞【bāo】计数。消化方法按【àn】照细胞【bāo】传【chuán】代【dài】方法的9-21步【bù】骤进行，后的重悬液使用血清。悬浮细胞直接【jiē】计数后【hòu】离【lí】心，用血清重悬浮，加DMSO至终【zhōng】浓【nóng】度为【wéi】10%。加入DMSO后迅速混匀，按每lml的数量分配【pèi】到冻存管中。本公【gōng】司按每个冻存【cún】管细胞【bāo】数目大于1X106个细胞冻存【cún】。
 
非小细胞肺癌细胞(H1792)注意事项：
收到细【xì】胞后【hòu】，若【ruò】发现干冰己挥【huī】发【fā】干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞【bāo】有污染，请立即与【yǔ】我们电联。
所有【yǒu】动物细胞均视为【wéi】有【yǒu】潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内【nèi】操【cāo】作，并请【qǐng】注【zhù】意防护，所【suǒ】有废液及【jí】接触过此细胞的器皿需要灭【miè】菌后方【fāng】能丢弃。