仓鼠肺细胞（CHL）

仓鼠肺细胞（CHL)
细胞介绍
该细胞广泛应用于染色体异常测试。。
 
细胞特性
1)来源：中国仓鼠肺
2)形态：成纤维细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装运【yùn】输和保存【cún】：可选择干冰运输及发【fā】送复苏存【cún】活细【xì】胞方式【shì】：（1)干冰运输，收到后【hòu】立即转入液氮冻存或【huò】直接复苏；（2)存【cún】活细胞，收到后应继续【xù】生长【zhǎng】，传代达到细胞生长状态【tài】良好时【shí】，再进行冻【dòng】存【cún】。具体操【cāo】作见【jiàn】细【xì】胞培养步骤。
 
仓鼠肺细胞（CHL)细胞用途：仅供使用。
细胞培养步骤
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 RPIVM-1640 培养基(RPIVM-1640:GIBCO,添加 NaHC031.5g八,D-葡萄糖2.5g八，丙【bǐng】酮酸钠O.llg八)，90%;胎牛血清【qīng】，10%。或【huò】者：DMEM培养基(GIBCO,添加NaHC031.5g八)，90%;胎【tāi】牛血清【qīng】，10%。
2. 培养条件：气相：空【kōng】气，95%;二氧化碳，5%。温度：37摄氏【shì】度，培养箱【xiāng】湿【shī】度为70%-80%。
3.冻【dòng】存液：90%*培养【yǎng】基，10%DMSO,现用现【xiàn】配。液氮储存【cún】。
  
2)细胞处理：
复苏【sū】细胞：将含有lmL细胞悬液【yè】的【de】冻存管在37°C水浴中迅【xùn】速摇晃解冻，加【jiā】入4mL培【péi】养【yǎng】基【jī】混【hún】合均匀。在【zài】1000RPM条件下离心4分钟，弃去【qù】上清液【yè】，补加l-2mL培养基后吹匀。然【rán】后将所有细胞悬液加【jiā】入培养瓶中培养过夜（或【huò】将细胞悬液加【jiā】入l〇cm皿中，加【jiā】入约【yuē】8ml培养【yǎng】基，培【péi】养过夜）。第二天换液【yè】并【bìng】检查【chá】细胞密度。细【xì】胞【bāo】传【chuán】代：如果细【xì】胞密度达80%-90%，即【jí】可进【jìn】行传代培养。对于贴【tiē】壁【bì】细胞，传【chuán】代【dài】可参考以【yǐ】下方法：弃去培养上清【qīng】，用不【bú】含钙、镁离子的PBS润洗细胞9-21次【cì】。力口 2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于【yú】培【péi】养瓶中，置【zhì】于37°C培【péi】养箱中消化9-21分钟，然后在显微镜【jìng】下观察细胞消【xiāo】化情况若细胞大部变圆【yuán】并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶【píng】后加少量培养基终【zhōng】止按6-8ml/瓶补【bǔ】加培养基，轻【qīng】轻【qīng】打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加l-2mL培养液后吹匀。将【jiāng】细胞悬液按1: 2到1: 5的比例分到新的含【hán】8ml培养基的新皿中【zhōng】或【huò】者瓶中。
细胞冻存：待细胞生长状态良好【hǎo】时，可进行【háng】细胞冻【dòng】存。贴【tiē】壁细胞冻存时【shí】，弃去培养基后加入少【shǎo】量胰酶，细胞变圆脱落后，加入【rù】约lml含血【xuè】清的培【péi】养【yǎng】基后加【jiā】入【rù】冻存管中，再添加1〇%DMSO后进【jìn】行【háng】冻存。
 
仓鼠肺细胞（CHL)注意事项：
收到细胞后，若发【fā】现干冰己挥发干净、冻【dòng】存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染【rǎn】，请即【jí】与【yǔ】我【wǒ】们电联。
所【suǒ】有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安【ān】全台内【nèi】操作，并请【qǐng】注意防护，所【suǒ】有【yǒu】废【fèi】液及【jí】接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能【néng】丢【diū】弃【qì】。