人子宫内膜腺癌细胞（HEC-1-A）

人子宫内膜腺癌细胞(HEC-1-A)
细胞介绍：
这株细胞及其亚【yà】株HEC-1-B是H. Kuramoto及其【qí】同【tóng】事1968年【nián】从一【yī】位IA期子宫内膜癌患者身上分离得到的。PAF可【kě】以诱导其c-fos的【de】表达【dá】。
  
本公司的细胞培养操作规程，供参考
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 DMEM/F-12 培【péi】养【yǎng】基(DMEM/F-12(1:1)，GIBC0、90%;胎牛血【xuè】清，10%。
2. 培养条【tiáo】件：气相：空气，95%;二氧化碳，5%。温【wēn】度：37摄【shè】氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3.冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏【sū】细胞：将含有lmL细胞悬液【yè】的冻存管【guǎn】迅速放入【rù】37°C水【shuǐ】浴中（水面要低 于冻存【cún】管盖部）摇晃解【jiě】冻，移【yí】入【rù】事先准备好的含【hán】有4mL培养基的【de】15ml离心管中混合均匀【yún】。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上【shàng】清液，加【jiā】入lmL培 养基后吹【chuī】匀。然后将所有细胞【bāo】悬液【yè】移入含有5ml培养基的培养瓶中培【péi】养【yǎng】过【guò】夜。 第二天换【huàn】液并检查细【xì】胞密【mì】度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
  
人子宫内膜腺癌细胞(HEC-1-A)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上【shàng】清，用【yòng】不含【hán】钙【gài】、镁离【lí】子的【de】PBS润【rùn】洗细胞9-22次。加2m消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于【yú】培【péi】养【yǎng】瓶中，置于37°C培养箱中消化【huà】9-22分钟，然后在【zài】显【xiǎn】微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并【bìng】脱【tuō】落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3ml此细胞的 培【péi】养基终止消化。轻轻吹打后吸出，移入15ml离【lí】心管中，在1000RPM条件下【xià】离心【xīn】4分钟， 弃去上清液，加入【rù】lmL培养液后吹匀。移入【rù】到【dào】事先【xiān】准备【bèi】好的含【hán】有【yǒu】5ml培养基【jī】的T-25培养【yǎng】瓶【píng】中【zhōng】或含有14ml培养 基的T-75培养瓶中培养。
 
细胞【bāo】冻存：待细【xì】胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时【shí】，先 要消化处理并进行细胞计【jì】数。消化方【fāng】法按【àn】照细胞传代方法的9-22步骤进行，后的重悬液【yè】使用血清。悬【xuán】浮【fú】细【xì】胞【bāo】直接计数后离心【xīn】，用血清重悬浮，加DMSO至终【zhōng】浓度为10%。加入DMSO后迅【xùn】速混匀，按每lml的数量分配到冻存【cún】管【guǎn】中。本【běn】公司按每个【gè】冻存管细【xì】胞数【shù】目大于1X106个细【xì】胞冻存。
 
注意事项：
收【shōu】到细胞后，若发现干冰己挥【huī】发干【gàn】净、冻存管瓶盖脱【tuō】落、破损及细胞有污【wū】染，请立即与我们【men】电【diàn】联。
所【suǒ】有动物细胞【bāo】均视为有潜在【zài】的生【shēng】物危害性，必【bì】须在二级生物安全台内操作，并请【qǐng】注意【yì】防【fáng】护，所有废液及接【jiē】触【chù】过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
 
细胞特性：
1)来源：子宫;
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人子宫内膜腺癌细胞(HEC-1-A)细胞接受后的处理：
1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2.请先在【zài】显微镜下确认细胞生【shēng】长【zhǎng】状态【tài】，去掉封口【kǒu】膜并将T25瓶置【zhì】于37°C培养约 2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4.如【rú】果细【xì】胞长满（90%以上）请【qǐng】及时进行【háng】细胞传代【dài】，传代培【péi】养用6ml本公司附带的【de】*培【péi】养基。
5.接到细【xì】胞次日，请检【jiǎn】查细胞是否【fǒu】污染，若发【fā】现污染或疑似【sì】污染，请及【jí】时与我们取得电联。
细胞用途：仅供使用。