人子宫内膜腺癌细胞（HEC-1-B）

人子宫内膜腺癌细胞(HEC-1-B)
细胞介绍：
该细胞是H. Kuramoto 1968年【nián】分【fèn】离的HEC-1-A细胞亚株。不同于HEC-A-1的是：该亚【yà】株在【zài】培养【yǎng】第【dì】135天【tiān】到190天之间表现【xiàn】出稳【wěn】定【dìng】的生长周期【qī】，且重现扁平，与亲本细【xì】胞系【xì】相比更具铺路石式样。此外主要染色体组是亲本细胞的两倍。
 
本公司的细胞培养操作规程，供参考
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 MEM 培【péi】养基【jī】(MEM, GIBC0，添【tiān】加 NaHC031.5g八，丙 酮酸钠O.llg八)。
2. 培养【yǎng】条件：气相【xiàng】：空气【qì】，95%;二氧化碳，5%。温度：37°C，培【péi】养箱湿【shī】度为70%-80%。
3.冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
2)细胞处理：
复苏细胞：将含有lmL细胞悬【xuán】液的【de】冻存管【guǎn】迅速放入【rù】37°C水浴【yù】中（水面【miàn】要低于冻【dòng】存管【guǎn】盖部【bù】）摇晃解冻【dòng】，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管【guǎn】中混合均匀。在【zài】1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液【yè】，加入lmL培 养基后【hòu】吹匀。然后将所有细胞【bāo】悬液移入【rù】含有5ml培【péi】养基的【de】培【péi】养瓶中培养过夜。第【dì】二天换液并检查【chá】细胞密度【dù】。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人子宫内膜腺癌细胞(HEC-1-B)对于贴壁细胞，传代可参考以下【xià】方法：弃【qì】去培养上清，用不【bú】含【hán】钙、镁【měi】离子【zǐ】的PBS润洗细【xì】胞9-22次。力【lì】口2m丨消化【huà】液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培【péi】养瓶中，置于37°C培养箱中消化9-22分钟，然后在显微镜下【xià】观察细胞【bāo】消【xiāo】化情况，若细胞【bāo】大部分【fèn】变圆并【bìng】脱落，迅速拿回操作台，轻敲【qiāo】几下【xià】培养瓶后加入3ml此细胞的培养基终止消化。轻轻吹打后【hòu】吸出，移入15ml离心【xīn】管中，在1000RPM条件【jiàn】下【xià】离心【xīn】4分钟【zhōng】，弃去【qù】上【shàng】清液，加入lmL培养液后吹匀。移入到事【shì】先准备好的含有5ml培养基【jī】的T-25培养瓶中或含有14ml培养基的T-75培养瓶中【zhōng】培养【yǎng】。
 
细胞冻存：待细胞生【shēng】长状态良好时【shí】，可【kě】进行细胞冻【dòng】存。贴壁细胞冻【dòng】存时【shí】，先要【yào】消化【huà】处【chù】理并【bìng】进行【háng】细胞【bāo】计数。消【xiāo】化方法按照细胞传代方法的9-22步骤进行，后的【de】重悬液使用血清。悬浮细胞直接计数后离心，用血【xuè】清重【chóng】悬浮【fú】，加DMSO至终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每lml的【de】数量分【fèn】配【pèi】到冻【dòng】存管中。本公司按每个冻存管【guǎn】细胞数目大于1X106个【gè】细【xì】胞【bāo】冻存。
 
注意事项：
收到细胞后，若发【fā】现干【gàn】冰己挥发干【gàn】净、冻存【cún】管瓶盖【gài】脱落、破损及【jí】细胞有【yǒu】污染，请立即与【yǔ】我们电联。
所【suǒ】有动物【wù】细胞均视为有潜【qián】在的生物危害【hài】性，必须在二级生【shēng】物安全台【tái】内操作【zuò】，并【bìng】请注意防护，所有【yǒu】废液及接【jiē】触过此细胞【bāo】的器皿需要灭菌后方能【néng】丢弃。
 
细胞特性：
1)来源：子宫内膜腺癌
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人子宫内膜腺癌细胞(HEC-1-B)细胞接受后的处理：
1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2.请先在显微镜下确认细胞【bāo】生长状态【tài】，去掉【diào】封【fēng】口膜并【bìng】将T25瓶置于37°C培养约 2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4.如果【guǒ】细胞长满（90%以上）请【qǐng】及时进【jìn】行【háng】细胞传代，传代培【péi】养【yǎng】用6ml本公司附带的【de】*培养基。
5.接到细胞次日，请检查细【xì】胞是【shì】否【fǒu】污染，若发现污染或【huò】疑似污【wū】染，请及时与我【wǒ】们取得【dé】电联。
细胞用途：仅供使用。