人肝癌细胞（Hep G2）

人肝癌细胞(Hep G2)
细胞介绍：
该细胞系来【lái】自15岁男【nán】性白人的组织。形态为上皮形，模式【shì】染色体数【shù】为【wéi】55,在免疫抑制【zhì】小【xiǎo】鼠中不致瘤【liú】。
 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备MEM培养基(MEM，GIBCO，添【tiān】加NaHC031.5g八【bā】，丙酮酸钠O.llg八【bā】)，90%;胎牛【niú】血清，10%。
2.培养条件：气相：空气，95%;二【èr】氧化碳，5%。温度【dù】：37摄氏度，培养箱【xiāng】湿度【dù】为70%-80%。
3.冻存液：90%*培养基，10%DMSO,现【xiàn】用现配。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏细胞【bāo】：将含【hán】有lmL细【xì】胞悬液的冻【dòng】存管在37°C水浴中迅速【sù】摇晃解冻，加入4mL培【péi】养基混【hún】合均匀。在1000RPM条件下离【lí】心4分【fèn】钟【zhōng】，弃去上清液，补加【jiā】l-2mL培养基后【hòu】吹匀【yún】。然后将所有细【xì】胞悬液【yè】加入培养瓶中培【péi】养过夜（或将细胞悬液加入l〇cm皿中，加入约8ml培养【yǎng】基，培养过【guò】夜）。第二天换【huàn】液并检查细胞密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人肝癌细胞(Hep G2)对于贴壁细胞【bāo】，传代可参【cān】考以下【xià】方法：弃去培养上清【qīng】，用【yòng】不含钙、镁离子的PBS润洗细胞9-22次。力口 2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养【yǎng】瓶中，置【zhì】于【yú】37°C培养箱【xiāng】中消化9-22分【fèn】钟，然后在显微镜下【xià】观察细胞消化情【qíng】况，若细胞大部 分变圆【yuán】并脱落，迅速拿【ná】回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养【yǎng】基终【zhōng】止 消化。按6-8ml/瓶补加【jiā】培【péi】养基，轻轻打匀后吸出【chū】，在1000RPM条【tiáo】件【jiàn】下离【lí】心4分 钟，弃去上清【qīng】液【yè】，补加l-2mL培养液【yè】后吹【chuī】匀。将【jiāng】细【xì】胞悬液【yè】按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培养基【jī】的新皿中或者 瓶【píng】中。
细【xì】胞【bāo】冻存：待细胞生长状态【tài】良好时，可进行细胞冻存。贴壁【bì】细胞冻存时，弃 去培养基【jī】后【hòu】加入少量胰酶，细胞变圆脱【tuō】落后，加入约lml含【hán】血清的培养【yǎng】基后【hòu】 加【jiā】入冻存【cún】管中，再添加1〇%DMSO后进行冻存。
 
注意事项：
收到细胞【bāo】后，若发现干冰【bīng】己挥【huī】发干净、冻【dòng】存管瓶【píng】盖脱落、破损及细【xì】胞有污【wū】染【rǎn】，请立即与我们电联
所有动物细胞均视【shì】为【wéi】有潜【qián】在【zài】的【de】生物危害性，必须在二级生物安全台内操【cāo】作，并请注意防护，所【suǒ】有废液【yè】及接触过此细胞的器皿【mǐn】需要灭菌后方能丢弃【qì】。
 
人肝癌细胞(Hep G2)细胞特性：
1)来源：肝细胞癌
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
运输和保存：可选【xuǎn】择【zé】干冰运输及发送复苏存活细胞方式：（1)干冰运【yùn】输，收到【dào】后立即转入液氮【dàn】冻存或【huò】直接复苏；（2)存活【huó】细胞，收到【dào】后应继【jì】续生长，传代达到【dào】细【xì】胞生长状态【tài】良好时，再【zài】进【jìn】行冻存。具体操作见细胞培养【yǎng】步骤。
细胞用途：仅供使用。