人骨肉瘤细胞 （HOS）

人骨肉瘤细胞 (HOS)
细胞介绍：
该【gāi】细胞是从一名13岁【suì】的白人女性的【de】骨肉瘤组【zǔ】织中分离【lí】建立的，表【biǎo】现为扁平形态、低饱和密【mì】度、软琼脂中的【de】低克隆形成率和对化【huà】合物及感染的敏感性。

 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 MEM 培养基(MEM:GIBCO);北美胎【tāi】牛【niú】血清(United States， GIBCO)，10%，添加NEAA，1%。

2. 培【péi】养条件：气相：空【kōng】气，95%;二氧化碳【tàn】，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿【shī】度为70%-80%。
3.冻存液：90%*培养基，10%DMSO,现【xiàn】用现配。液氮储存【cún】。
 
2)细胞处理：
复苏细胞：将【jiāng】含有【yǒu】lmL细胞【bāo】悬液的冻存管【guǎn】在37°C水浴中迅速摇【yáo】晃【huǎng】解冻，加入【rù】4mL培养基混合均匀。在1000RPM条【tiáo】件下离心4分【fèn】钟，弃去上清液，补加l-2mL培【péi】养基后吹匀。然后将所【suǒ】有细胞悬【xuán】液加入培养【yǎng】瓶中【zhōng】培养过夜【yè】（或将细【xì】胞悬液加入【rù】l〇cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人骨肉瘤细胞 (HOS)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃【qì】去培【péi】养上清，用不【bú】含【hán】钙、镁离子的PBS润【rùn】洗细胞9-22次。力口【kǒu】2m丨消化【huà】液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中，置于37°C培养箱【xiāng】中消【xiāo】化9-22分钟，然后在显【xiǎn】微镜下观察细胞消化【huà】情况，若细【xì】胞大部 分变圆【yuán】并脱落，迅速拿回操【cāo】作台，轻敲几下培【péi】养瓶【píng】后加少量培养【yǎng】基终止【zhǐ】消【xiāo】化。按6-8ml/瓶补加培养基【jī】，轻【qīng】轻打匀后吸出【chū】，在1000RPM条件下离【lí】心4分钟，弃去上清液，补加l-2mL培养液后吹匀。将细【xì】胞悬液按1: 2到【dào】1: 5的比【bǐ】例【lì】分到新的含8ml培【péi】养基的【de】新皿中或者瓶中。

细胞冻【dòng】存：待细胞生长【zhǎng】状态良好【hǎo】时，可进行细胞冻存。贴壁细胞【bāo】冻存时，弃【qì】去【qù】培养基后加入【rù】少【shǎo】量胰【yí】酶，细胞变圆脱落后，加入约lml含血清的【de】培养【yǎng】基【jī】后 加入冻存管中，再【zài】添加1〇%DMSO后进行冻存【cún】。

 
注意事项：
收到细胞后，若发现干冰己【jǐ】挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细【xì】胞有污【wū】染，请立【lì】即与【yǔ】我们电联【lián】。
所有动物细胞均【jun1】视为有【yǒu】潜在的【de】生【shēng】物危害性，必须【xū】在二级生物安【ān】全台内【nèi】操作，并请注意防护，所有废【fèi】液及接【jiē】触过此细胞的器【qì】皿需要灭菌后方能丢弃。

 
人骨肉瘤细胞 (HOS)细胞特性：
1)来源：骨
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
运输和保存：使用【yòng】含有胎牛血【xuè】清的2ml冻【dòng】存管发送存【cún】活细胞。收【shōu】到细胞后，可在【zài】1000RPM，常温条件下【xià】，离心5min后，于洁【jié】净操作台弃去上【shàng】清，加入【rù】推荐使用的培养基后转移至l〇cm培养【yǎng】皿或者T25培养【yǎng】瓶【píng】中培养，传代达到细胞生长状态良好时，再进【jìn】行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

细胞用途：仅供使用。