人ruxian癌细胞（Hs578T）

人ruxian癌细胞(Hs578T)
细胞介绍：
Hs 578T细胞株源自乳房癌。它【tā】与【yǔ】正常成纤维细胞样细胞株Hs 578Bst起源于同【tóng】一位患者。HS578T细胞【bāo】株初是多【duō】角形的，但【dàn】在传代过程中选择并克隆了星形【xíng】的细胞【bāo】形态。电镜【jìng】下观【guān】察【chá】到酪蛋白颗粒聚集，桥粒，紧密连接，脂质体【tǐ】和光滑内质网小【xiǎo】泡【pào】。与Hs578Bst—样，未检测到雌激素受体和内生。

 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 DMEM 培养基【jī】(DMEM，GIBCO,添加 NaHC031.5g八【bā】，添加【jiā】0.01mg/ml牛胰岛【dǎo】素)，90%;胎牛血清，10%。

2.培养条【tiáo】件：气相【xiàng】：空气，95%;二氧【yǎng】化碳，5%。温度【dù】：37摄氏度，培养箱【xiāng】湿度【dù】为70%-80%。
3.冻存【cún】液【yè】：90%*培养基，10%DMSO,现【xiàn】用现配。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复【fù】苏细胞：将【jiāng】含有lmL细胞悬【xuán】液的冻存管【guǎn】在37°C水浴【yù】中迅速摇晃解冻，加【jiā】入4mL培养基【jī】混合均匀。在1000RPM条件【jiàn】下离心【xīn】4分钟，弃【qì】去上【shàng】清液，补加l-2mL培养基【jī】后吹匀。然后将【jiāng】所有细胞悬液加入培【péi】养瓶中培养过夜【yè】（或将【jiāng】细胞【bāo】悬【xuán】液加【jiā】入l〇cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人ruxian癌细胞(Hs578T)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上清【qīng】，用不含钙【gài】、镁【měi】离【lí】子的PBS润洗【xǐ】细胞9-22次。力口2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中，置于【yú】37°C培养箱中【zhōng】消【xiāo】化9-22分钟，然【rán】后在显微镜下观察【chá】细胞消化情况，若细胞【bāo】大【dà】部 分变圆并脱落【luò】，迅速拿回操作台，轻敲【qiāo】几下培【péi】养瓶后加少量培养基终【zhōng】止【zhǐ】消化。按6-8ml/瓶【píng】补加【jiā】培【péi】养基【jī】，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离【lí】心4分钟，弃去上【shàng】清液，补加l-2mL培养液【yè】后吹【chuī】匀。将细胞悬【xuán】液按1: 2到1: 5的比例分到【dào】新【xīn】的含8ml培养基【jī】的新皿中或者瓶中。

3)细胞【bāo】冻存：待细胞生长状态良好【hǎo】时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻【dòng】存【cún】时，弃去培养【yǎng】基后加入【rù】少量胰酶，细胞【bāo】变圆脱落后【hòu】，加【jiā】入约lml含血清的培【péi】养基后加【jiā】入冻存管【guǎn】中，再添【tiān】加1〇%DMSO后进行冻存。 

注意事项：
收到细胞【bāo】后，若发现干冰己【jǐ】挥发干净、冻存管瓶【píng】盖脱落、破损及细胞有污染，请立即【jí】与【yǔ】我【wǒ】们电联【lián】。
所有动物细胞均视为有潜在的生【shēng】物危【wēi】害性【xìng】，必须在二级【jí】生物安全台内操作，并请【qǐng】注意防护，所有废液【yè】及接【jiē】触过【guò】此【cǐ】细胞的器皿【mǐn】需要灭菌后方能丢弃。

细胞特性：
1)来源：ruxian癌
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人ruxian癌细胞(Hs578T)运【yùn】输和保【bǎo】存：使用含有胎牛血清的【de】2ml冻存管发送【sòng】存活细胞【bāo】。收到细胞后，可在1000RPM，常温条件下【xià】，离心5min后，于洁净操【cāo】作台弃去上清【qīng】，加入推荐使【shǐ】用的培养基后转移至l〇cm培养皿【mǐn】或者【zhě】T25培养瓶中培【péi】养，传代达【dá】到细胞【bāo】生长【zhǎng】状态良好时【shí】，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

细胞用途：仅供使用。