人绒毛膜癌细胞 （JEG-3）

人绒毛膜癌细胞 (JEG-3)
细胞介绍：
这【zhè】是一株超【chāo】三倍体人类细胞【bāo】株。其典【diǎn】型染色体数为71，发【fā】生率【lǜ】为34%，多倍体率【lǜ】为2_6%。
 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备MEM培【péi】养基(GIBCO,添加NaHC031.5g/L，丙酮酸钠【nà】O.llg八)，90%;胎牛【niú】血【xuè】清，10%。
2.培【péi】养条件：气相：空气，95%;二【èr】氧化碳，5%。温度：37摄氏【shì】度【dù】，培养箱湿度为70%-80%。
3.冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏细胞：将含【hán】有lmL细胞【bāo】悬【xuán】液的【de】冻存管迅速放入37°C水浴中（水【shuǐ】面要低于冻存管盖部【bù】）摇晃解冻，移入事先准【zhǔn】备好的【de】含有4mL培养基的15ml离【lí】心【xīn】管中混【hún】合【hé】均匀【yún】。在1000RPM条件下离【lí】心4分钟【zhōng】，弃去上清液，加入lmL培养基后吹匀。然【rán】后将所有细胞悬液【yè】移入【rù】含有【yǒu】5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二【èr】天换【huàn】液并【bìng】检查细胞【bāo】密【mì】度。

 
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人绒毛膜癌细胞 (JEG-3)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培【péi】养上【shàng】清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞9-22次。力口2m丨【shù】消化液【yè】（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于【yú】培养瓶中，置于【yú】37°C培【péi】养箱中消化9-22分钟，然后在【zài】显微镜下观察【chá】细胞消化情况，若细胞【bāo】大部分【fèn】变圆【yuán】并脱落【luò】，迅速拿回操作【zuò】台，轻敲几【jǐ】下培养瓶后【hòu】加入3ml此细胞的 培【péi】养【yǎng】基【jī】终止消化。轻轻吹打后吸出，移入15ml离【lí】心管中，在1000RPM条件下离心4分钟，弃【qì】去上【shàng】清【qīng】液，加【jiā】入lmL培【péi】养液【yè】后吹匀。移【yí】入到【dào】事先准备好的含【hán】有5ml培养基的T-25培养瓶中或含有14ml培养 基【jī】的T-75培【péi】养【yǎng】瓶中培养。

 
细胞冻存：待细胞生长【zhǎng】状态良【liáng】好【hǎo】时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，先【xiān】要消化【huà】处理并【bìng】进行细【xì】胞计【jì】数。消化方法按照细胞【bāo】传代【dài】方法的【de】9-22步骤进行，后的重悬液使用血清【qīng】。悬浮细胞直接计数后离心【xīn】，用血清【qīng】重【chóng】悬浮，加DMSO 至【zhì】终浓度为10%。加入【rù】DMSO后迅速【sù】混匀，按每lml的数量分配到冻存【cún】管 中。本公司按每个冻存【cún】管细胞【bāo】数目【mù】大于1X106个【gè】细【xì】胞冻存。悬浮细胞冻【dòng】存时，应将细【xì】胞收集，1000RPM，常温条【tiáo】件下【xià】离心【xīn】5分钟，少量保存上清液（防止细胞吸【xī】走)，加入【rù】部分新鲜培养基【jī】，吹打均匀【yún】后，加入到【dào】冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO摇匀后进行冻存。

 
注意事项：
收【shōu】到细胞【bāo】后，若发现干【gàn】冰己挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及【jí】细【xì】胞有【yǒu】污染，请立即与我们电【diàn】联。
所有动【dòng】物细胞均【jun1】视【shì】为【wéi】有潜【qián】在的生物【wù】危害性，必须在二级生物【wù】安全台内操作，并请注意防护，所有废【fèi】液【yè】及接触过此细胞的器皿需【xū】要灭菌后方能丢弃。

  
细胞特性：
1)来源：绒毛膜癌
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人绒毛膜癌细胞 (JEG-3)细胞接受后的处理：
1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2.请先在【zài】显【xiǎn】微镜下确认细胞【bāo】生【shēng】长【zhǎng】状态，去掉封口膜并【bìng】将T25瓶置于37°C培养约 2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4.如果细胞长满【mǎn】（90%以上【shàng】）请及时进行【háng】细【xì】胞传【chuán】代，传代培【péi】养用【yòng】6ml本公司附带的*培养基。
5.接到细【xì】胞【bāo】次日，请检查【chá】细胞是【shì】否【fǒu】污染，若【ruò】发现污染或疑似污染，请及时【shí】与我们取得电联。
细胞用途：仅供使用。