人ruxiian癌细胞（MCF-7）

人rux癌细胞(MCF-7)
细胞介绍：
MCF-7细胞【bāo】保留了【le】多个【gè】分化了【le】的ruxian上皮的特性，包【bāo】括：能【néng】通过胞【bāo】质雌激素受体加工雌二醇并能形成【chéng】圆形【xíng】复合物（domes)。该细胞【bāo】含【hán】有Tx-4癌基因。肿瘤坏死【sǐ】因子【zǐ】ct(TNF alpha)可以抑制MCF-7细【xì】胞的生长【zhǎng】。抗雌激素【sù】处理细胞能调变IGFBP'S 的分泌。

 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1. 准【zhǔn】备MEM培【péi】养基(MEM，GIBCO,添加【jiā】NaHC031.5g八，丙【bǐng】酉同酸钠O.llg八，0.01mg/ml牛胰岛素【sù】)，90%;胎牛血清，10%。

2.培养条【tiáo】件：气相【xiàng】：空【kōng】气，95%;二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3.冻存【cún】液：90%*培【péi】养基【jī】，10%DMSO,现用现配。液氮【dàn】储存。
 
2)细胞处理：
复【fù】苏细胞：将含有lmL细胞悬【xuán】液的冻【dòng】存管【guǎn】在37°C水浴中【zhōng】迅速摇【yáo】晃解冻，加【jiā】入【rù】4mL培养基【jī】混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟【zhōng】，弃去上清【qīng】液，补加【jiā】l-2mL培【péi】养基后吹【chuī】匀。然后将【jiāng】所有细胞悬液加【jiā】入【rù】培【péi】养瓶中培养过夜（或将 细胞悬液加入l〇cm皿中【zhōng】，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

 
人rux癌细胞(MCF-7)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上清【qīng】，用不含钙、镁离【lí】子【zǐ】的PBS润洗细胞9-22次【cì】。力口【kǒu】2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养【yǎng】瓶中，置【zhì】于37°C培【péi】养箱中消化9-22分【fèn】钟，然后在显微镜【jìng】下观察细胞消【xiāo】化情况，若细胞大【dà】部分变圆并脱落，迅速拿回操作【zuò】台，轻敲【qiāo】几下【xià】培养瓶后【hòu】加少量培养基终止消化。按6-8ml/瓶补加培养【yǎng】基，轻【qīng】轻【qīng】打匀后吸出，在【zài】1000RPM条【tiáo】件下离心【xīn】4分钟，弃去上清液，补加【jiā】l-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按【àn】1: 2到1: 5的比例分到新【xīn】的含【hán】8ml培【péi】养基的【de】新皿中【zhōng】或者瓶中。

 
细胞冻存【cún】：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁【bì】细胞冻存【cún】时，弃【qì】去培养基后加入少量【liàng】胰酶【méi】，细胞变圆脱【tuō】落后，加入约lml含【hán】血清【qīng】的培养基后 加入冻存【cún】管【guǎn】中，再添加1〇%DMSO后进行冻存。

 
注意事项：
收到细胞【bāo】后，若【ruò】发现干冰己挥【huī】发干净【jìng】、冻存【cún】管瓶盖【gài】脱落、破损及【jí】细胞有污【wū】染，请立即与我们电联。
所有动物细胞均【jun1】视为有潜【qián】在【zài】的生物危害性，必【bì】须在二级生【shēng】物安全【quán】台内操作，并请【qǐng】注意防护【hù】，所有【yǒu】废液及接触过此细胞的【de】器皿需要灭菌后方能丢弃。

 
细胞特性：
1)来源：腺癌，ruxian，胸水
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人rux癌细胞(MCF-7)运输和【hé】保存：可选择干冰运输及发送复【fù】苏存【cún】活细胞方【fāng】式：（1)干【gàn】冰【bīng】运输，收到后立即转入【rù】液【yè】氮【dàn】冻存或直接复苏；（2)存活细胞

，收到后应继续生长，传【chuán】代达到细胞生长状态良【liáng】好【hǎo】时，再进行冻【dòng】存。具体操【cāo】作【zuò】见细【xì】胞培【péi】养步骤。
细胞用途：仅供使用。