人ruxian癌细胞（MDA-MB-231）

人ruxian癌细胞(MDA-MB-231)
细胞介绍：
MDA-MB-231是从【cóng】一名51岁的白人女【nǚ】性【xìng】ruxian癌患者的胸水中分离【lí】建立的。该细【xì】胞表达表皮生长因子EGF受体、TGF- a受体和WNT7B

癌基因。
 
细胞培养步骤
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准【zhǔn】备【bèi】 DMEM-H 培养基(DMEM-H，GIBCO,添【tiān】加 NaHC031.5g/L)， 90%;胎牛【niú】血清，10%。（DMEM 液体培养基：

GIBCO，11995-065)。
2.培养条件：37摄氏度气相：空气，100%。
3. 冻存液：90%*培【péi】养基，10%DMSO,现用【yòng】现配。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏细胞：将含有lmL细【xì】胞悬液的【de】冻存管在37°C水浴【yù】中迅速【sù】摇【yáo】晃解冻，加入4mL培养基混【hún】合【hé】均匀。在1000RPM条件下离【lí】心4分钟【zhōng】，

弃去上清液【yè】，补加【jiā】l-2mL培养基后【hòu】吹匀。然后将【jiāng】所有细【xì】胞悬液加入培【péi】养【yǎng】瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入l〇cm皿中，加【jiā】入约【yuē】8ml

培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人ruxian癌细胞(MDA-MB-231)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃【qì】去培【péi】养上清，用不含钙、镁离子【zǐ】的PBS润洗细胞9-22次。力口2m丨消化【huà】液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于【yú】培养瓶中【zhōng】，置于37°C

培【péi】养箱中【zhōng】消化【huà】9-22分钟，然后在显微镜【jìng】下【xià】观【guān】察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并【bìng】脱落，迅【xùn】速拿回操作台，轻敲几【jǐ】下培养【yǎng】瓶后加

少量【liàng】培【péi】养基终止【zhǐ】 消化。按6-8ml/瓶【píng】补【bǔ】加培养基，轻轻打匀后【hòu】吸出，在1000RPM条件【jiàn】下离心4分钟，弃去上清液，补加l-2mL培养【yǎng】

液后吹匀。将细胞悬液按【àn】1: 2到【dào】1: 5的比例【lì】分到新的含8ml培【péi】养基的新【xīn】皿【mǐn】中或者瓶中。
 
细胞【bāo】冻存：待【dài】细胞生长状态【tài】良好时，可【kě】进行细胞冻【dòng】存。贴壁细胞冻存时，弃去培养【yǎng】基后加【jiā】入少【shǎo】量胰酶，细胞变圆脱落后，加入【rù】

约lml含血【xuè】清的【de】培养基【jī】后加入冻存管中，再添加1〇%DMSO后【hòu】进行冻存。
 
注意事项：
收到细胞【bāo】后，若发现【xiàn】干【gàn】冰己【jǐ】挥发干净、冻存管瓶盖【gài】脱落、破损及【jí】细胞有污染，请立即与我们电【diàn】联。
所有动物细胞均视为有潜【qián】在【zài】的生物危【wēi】害性，必须在【zài】二级生物安全【quán】台内【nèi】操作，并请注意防护，所【suǒ】有【yǒu】废液及接触【chù】过此细胞的器皿【mǐn】需

要灭菌后方能丢弃。
 
细胞特性：
1)来源：ruxian癌
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人ruxian癌细胞(MDA-MB-231)运输和保【bǎo】存：使用T25瓶充液发送【sòng】活细胞【bāo】。收到细胞后，请先在【zài】显微镜下检查细胞【bāo】生【shēng】长状【zhuàng】态，并将【jiāng】T25瓶【píng】置于培养箱约6h或过夜

后，再【zài】次检查细【xì】胞状态。若【ruò】状态良好，可【kě】按照【zhào】以下细胞培养步骤进行细【xì】胞后续处理操作。若发现可疑污染【rǎn】物，请及时【shí】与我们取【qǔ】

得电联。
细胞用途：仅供使用。