人ruxian癌细胞（MDA-MB-361）

人ruxian癌细胞(MDA-MB-361)
细胞介绍：
该细胞源自40岁女性ruxian癌的脑转移组织。
 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备L-15培养基(L-15:GIBCO)，80%;胎牛血【xuè】清，20%。
2. 培养条件：气相：空气，100%。温【wēn】度：37摄氏【shì】度，培养箱湿【shī】度为70%-80%。
3.冻【dòng】存液【yè】：90%*培养基，10%DMSO,现用【yòng】现配。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏细胞【bāo】：将含有lmL细胞悬液的冻存【cún】管在【zài】37°C水浴【yù】中迅速摇晃解【jiě】冻，加 入4mL培【péi】养基混合均匀。在1000RPM条件【jiàn】下离心4分钟，弃去上清【qīng】液，补加【jiā】l-2mL培养【yǎng】基后吹匀。然【rán】后将所有【yǒu】细胞悬液加入培养瓶中培养过【guò】夜（或将细胞悬【xuán】液【yè】加入l〇cm皿中，加【jiā】入约【yuē】8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人ruxian癌细胞(MDA-MB-361)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养【yǎng】上清，用不含钙、镁离【lí】子的PBS润洗细【xì】胞【bāo】9-22次。力口【kǒu】2m丨消化液【yè】（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于【yú】培养瓶【píng】中，置于37°C培【péi】养箱【xiāng】中消化9-22分钟【zhōng】，然后在显微镜下【xià】观察细胞消化情况【kuàng】，若细胞【bāo】大部分变【biàn】圆【yuán】并脱落，迅【xùn】速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后【hòu】加少【shǎo】量培养基终【zhōng】止消【xiāo】化。按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸【xī】出【chū】，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补【bǔ】加l-2mL培【péi】养液【yè】后吹【chuī】匀。将细胞悬液按1: 2到1: 5的比例分到【dào】新【xīn】的含8ml培养基【jī】的新【xīn】皿中或【huò】者瓶【píng】中。

 
细胞冻【dòng】存【cún】：待【dài】细【xì】胞生长【zhǎng】状态良好时，可进【jìn】行细胞冻存。贴【tiē】壁细胞冻存时，弃去培【péi】养【yǎng】基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加【jiā】入约lml含血清【qīng】的培养基后【hòu】加入【rù】冻存管中【zhōng】，再添加1〇%DMSO后进行【háng】冻存【cún】。

 
注意事项：
收【shōu】到细胞后，若发现干冰【bīng】己挥发【fā】干净、冻存管【guǎn】瓶盖脱落、破【pò】损及细胞有【yǒu】污染，请【qǐng】立即与我们电联。
所有【yǒu】动物细胞均视【shì】为有潜在的生物危害性，必须【xū】在二【èr】级生【shēng】物安全台【tái】内操作【zuò】，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器【qì】皿【mǐn】需要灭菌后方能丢弃。

 
细胞特性：
1)来源：ruxian癌
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人ruxian癌细胞(MDA-MB-361)运输【shū】和保存：使用含有胎牛血【xuè】清的2ml冻存【cún】管发【fā】送存活细胞。收【shōu】到细胞【bāo】后，可在1000RPM，常温条件下，离心5min后，于洁净操作台弃去上清，加【jiā】入推荐【jiàn】使【shǐ】用的培养【yǎng】基后转移至【zhì】l〇cm培【péi】养皿或者T25培【péi】养瓶中培养，传代达到【dào】细胞生长状态良好时【shí】，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

细胞用途：仅供使用。