人ruxian癌细胞（MDA-MB-435S）

人ruxian癌细胞(MDA-MB-435S)
细胞介绍：
MDA-MB-435S是一种纺锤形【xíng】的细【xì】胞，1976年由其亲【qīn】本(MDA-MB-435)中筛选得到。MDA-MB-435是从【cóng】一名31岁的转移性【xìng】ruxian导管腺【xiàn】癌【ái】

女性患者胸水中分【fèn】离得到的。 但【dàn】近来证【zhèng】明MDA-MB-435细胞被M14黑【hēi】色素瘤细胞污【wū】染。
 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备L-15培养基(L-15:GIBC0)，90%;胎牛血【xuè】清【qīng】，10%。
2.培养条件【jiàn】：气相：空气，95%;二【èr】氧化碳，5%。温度：37摄氏度【dù】，培养箱湿【shī】度为70%-80%。
3.冻存液：90%*培养基，10%DMSO,现用现【xiàn】配。液氮储【chǔ】存【cún】。
 
2)细胞处理：
复苏【sū】细胞：将【jiāng】含有【yǒu】lmL细胞悬【xuán】液的冻存管在37°C水浴中迅速摇晃【huǎng】解冻，加 入【rù】4mL培养基【jī】混合均【jun1】匀。在1000RPM条件【jiàn】下离心4分钟

，弃去上清液【yè】，补【bǔ】加l-2mL培养基后吹匀。然后将所【suǒ】有细【xì】胞悬液加入培养瓶【píng】中培养过夜【yè】（或将 细胞【bāo】悬液加入【rù】l〇cm皿中，加入约【yuē】

8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检 查细胞密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
  
人ruxian癌细胞(MDA-MB-435S)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃【qì】去培养上清，用不【bú】含钙、镁离子的PBS润洗【xǐ】细胞9-22次【cì】。力【lì】口2m丨消化【huà】液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中【zhōng】，置于37°C

培养箱中【zhōng】消化9-22分钟【zhōng】，然后在显【xiǎn】微镜下观察细【xì】胞【bāo】消【xiāo】化情况【kuàng】，若细胞大【dà】部 分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后

加少量培养【yǎng】基终止消化【huà】。按6-8ml/瓶补加培养基，轻【qīng】轻打【dǎ】匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清【qīng】液，补【bǔ】加l-2mL培养【yǎng】液后吹匀。 将【jiāng】细胞悬液按【àn】1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培养基的【de】新皿中或者【zhě】瓶中【zhōng】。

 
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离【lí】心【xīn】4分钟，弃去上清液，补加l-2mL 培养【yǎng】液【yè】后吹匀，将细【xì】胞悬液【yè】按1: 2到1: 5的比例【lì】分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

方法二：可选择半【bàn】数换液方式【shì】，弃去半【bàn】数【shù】培养基后【hòu】，将剩余细胞悬【xuán】起，将细【xì】胞悬液按1: 2到1: 3的比例分到新的【de】含8ml培养【yǎng】基的新皿中或者瓶中。

 
细胞冻【dòng】存：待【dài】细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细【xì】胞冻【dòng】存时，弃去【qù】培养基后【hòu】加入【rù】少量胰酶，细胞变圆【yuán】脱落【luò】后，加入约lml含【hán】血清的培养基后 加入冻存管中，再添加【jiā】1〇%DMSO后进行冻【dòng】存。悬浮细胞冻存【cún】时，应【yīng】将细胞收【shōu】集，1000RPM条【tiáo】件下离心【xīn】4分钟，少量保【bǎo】存上清【qīng】液（防【fáng】止细胞【bāo】吸走)，加入部分新鲜【xiān】培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入1〇%DMSO后进行冻存【cún】。

 
注意事项：
收到细胞后【hòu】，若发【fā】现干冰己挥发干净、冻【dòng】存【cún】管瓶盖【gài】脱【tuō】落、破损及细【xì】胞有污染【rǎn】，请立即与我们电联。
所有【yǒu】动物细胞【bāo】均视为【wéi】有潜在的生【shēng】物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所【suǒ】有废液【yè】及【jí】接触过此【cǐ】细胞的【de】器皿【mǐn】需要灭菌后方能丢弃。

 
细 特性：
1)来源：ruxian导管腺癌
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人ruxian癌细胞(MDA-MB-435S)运输和保存：可选择干冰【bīng】运输及发送复苏存活细【xì】胞【bāo】方式：（1)干冰【bīng】运输，收【shōu】到后【hòu】立【lì】即转入【rù】液氮冻存或直接复【fù】苏；（2)存活细胞

，收到后【hòu】应【yīng】继续【xù】生长，传【chuán】代达到细胞生长状态良好时【shí】，再进行【háng】冻【dòng】存。具体操作见细胞培养步骤。
细胞用途：仅供使用。