人胃癌细胞 （MGC-803）

人胃癌细胞 (MGC-803)
 
细胞介绍：
从一位53岁男性原发性胃低分化粘液样腺癌患者建立。
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 RPIVM-1640 培养【yǎng】基(RPIVM-1640:GIBCO,添加【jiā】 NaHC031.5g八, D-葡萄糖2.5g八，丙酮酸钠O.llg八)，90%;胎牛血清，10%。

2. 培养【yǎng】条件：气相：空气，95%;二氧化碳，5%。温度【dù】：37摄【shè】氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3.冻存液：90%*培养【yǎng】基，10%DMSO,现用现【xiàn】配。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏细胞：将含【hán】有lmL细【xì】胞悬【xuán】液的冻存管【guǎn】在37°C水浴中【zhōng】迅【xùn】速摇【yáo】晃解冻【dòng】，加入4mL培养基混合均匀。在【zài】1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加l-2mL培养【yǎng】基后吹匀。然【rán】后将所【suǒ】有细【xì】胞悬【xuán】液【yè】加【jiā】入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入【rù】l〇cm皿中，加入【rù】约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人胃癌细胞 (MGC-803)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养【yǎng】上【shàng】清，用不含钙、镁离子的【de】PBS润【rùn】洗细胞9-22次。力【lì】口2m丨消化液【yè】（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中【zhōng】，置于37°C培【péi】养箱【xiāng】中消化9-22分钟，然后在显微镜【jìng】下观察细胞消【xiāo】化情况，若细胞大【dà】部分变圆并脱落，迅速【sù】拿【ná】回操作台，轻【qīng】敲几【jǐ】下培养【yǎng】瓶后加少量培养基终止 消化。按6-8ml/瓶补加培【péi】养基，轻轻打匀后【hòu】吸出，在【zài】1000RPM条【tiáo】件下离【lí】心4分钟，弃【qì】去上【shàng】清液，补加l-2mL培养【yǎng】液【yè】后【hòu】吹匀【yún】。将细【xì】胞悬液【yè】按1: 2到1: 5的比例分【fèn】到新的含8ml培【péi】养基的新皿中或者 瓶中。

细【xì】胞冻存：待细胞生长状【zhuàng】态良好时，可进行【háng】细胞冻存。贴【tiē】壁细胞冻存时，弃【qì】去【qù】培【péi】养基后加【jiā】入少量胰酶，细胞变圆脱落后【hòu】，加入约lml含血清【qīng】的培养基后加入【rù】冻存管中，再添加1〇%DMSO后进【jìn】行冻存【cún】。

 
注意事项：
收到细胞后，若发现干冰己挥发干净、冻存管瓶盖【gài】脱落、破【pò】损及【jí】细【xì】胞有污染【rǎn】，请立即与我【wǒ】们电联。
所有【yǒu】动物细胞均【jun1】视【shì】为有潜在的生物危害性，必须在二级【jí】生物【wù】安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接【jiē】触过此【cǐ】细【xì】胞的器皿【mǐn】需要灭菌后方能丢弃。

 
细胞特性：
1)来源：胃癌
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人胃癌细胞 (MGC-803)运输【shū】和【hé】保存：使【shǐ】用含【hán】有胎牛血清的2ml冻存管发送存活细胞。收到细胞后，可在【zài】1000RPM，常温条件下，离心5min后，于【yú】洁【jié】净【jìng】操作台弃【qì】去【qù】上【shàng】清，加入【rù】推荐使用的培养【yǎng】基【jī】后转【zhuǎn】移至l〇cm培养皿或者T25培养瓶中培养，传代达到细胞生长 状态良好【hǎo】时，再进【jìn】行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

细胞用途：仅供使用。