人子宫颈表皮癌细胞（MS751）

人子宫颈表皮癌细胞(MS751)
细胞介绍：
这株细胞是Sykes于1974年建立的（参考ATCC HTB-33)。有【yǒu】报告【gào】称【chēng】MS751细胞含有状瘤18 (HPV-18)序列。后来发现MS751细胞【bāo】包含HPV-45基因组的一部【bù】分，而其中【zhōng】E6/E7区域表达呈poly(A)+RNA的形式。

 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备MEM培养【yǎng】基(MEM, GIBCO,添加NaHC03 1.5g八，丙【bǐng】酮酸 钠O.llg八【bā】)，90%;胎牛血清，10%。
2.培养【yǎng】条件：气相：空气，95%;二【èr】氧【yǎng】化碳，5%。温度【dù】：37摄氏度，培【péi】养箱湿度为70%-80%。
3.冻存液：90%*培【péi】养【yǎng】基，10%DMSO,现用现配【pèi】。液【yè】氮储存。
 
2)细胞处理：
复【fù】苏细胞：将含有【yǒu】lmL细胞悬液的冻存管在37°C水浴中迅速摇晃解冻，加【jiā】入4mL培养基混合均【jun1】匀。在【zài】1000RPM条件下【xià】离【lí】心4分钟，弃去上清【qīng】液，补加l-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入【rù】培养瓶【píng】中培【péi】养【yǎng】过夜（或将细【xì】胞悬液加入l〇cm皿【mǐn】中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人子宫颈表皮癌细胞(MS751)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃【qì】去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润【rùn】洗细【xì】胞9-22次。力口【kǒu】2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中【zhōng】，置于37°C培养箱中消化【huà】9-22分钟【zhōng】，然后在显微镜下【xià】观察细胞消【xiāo】化情况，若细胞大【dà】部分【fèn】变圆并【bìng】脱落，迅速拿回操作台【tái】，轻敲几下培【péi】养【yǎng】瓶后加少量培养基终止消化。按6-8ml/瓶【píng】补加培养基，轻轻打匀后吸出【chū】，在1000RPM条【tiáo】件【jiàn】下离心4分钟，弃去上清液，补加【jiā】l-2mL培【péi】养液后吹匀。将细胞悬液按1: 2到【dào】1: 5的【de】比例分到新的含【hán】8ml培养基的新皿【mǐn】中【zhōng】或者【zhě】瓶中。

细胞冻【dòng】存：待细【xì】胞生长状态良好时，可进【jìn】行细胞【bāo】冻存。贴壁细胞冻存时【shí】，弃去培养基后【hòu】加入少量胰酶，细【xì】胞变圆脱落后，加入约lml含【hán】血清的【de】培养基后 加入冻存管【guǎn】中，再添加1〇%DMSO后进行【háng】冻【dòng】存。

 
注意事项：
收到细胞后，若发现干冰己挥发干净【jìng】、冻存【cún】管瓶盖【gài】脱落、破【pò】损及【jí】细胞有污染，请【qǐng】立即与我们电联【lián】。
所有动物细胞【bāo】均视为有潜在的【de】生物危害性【xìng】，必须在二级生物安全【quán】台内【nèi】操作，并【bìng】请注意防护【hù】，所有废液及接【jiē】触过此【cǐ】细胞的器【qì】皿需要灭菌后方能丢弃。

 
细胞特性：
1)来源：宫颈表皮样癌淋巴结转移灶
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人子宫颈表皮癌细胞(MS751)运输和保存：可选【xuǎn】择【zé】干冰运输【shū】及发送复苏【sū】存活【huó】细胞方式：（1)干冰运【yùn】输，收到后立即【jí】转入液【yè】氮冻存或直接复苏；（2)存活细胞

，收【shōu】到后【hòu】应继续生长，传代【dài】达到细胞生长状态良好时，再进【jìn】行【háng】冻【dòng】存。具体操作见细胞培养步骤。
细胞用途：仅供使用。