神经内分泌前列腺癌细胞（NCI-H660）

神经内分泌前列腺癌细胞(NCI-H660)
细胞介绍：
该细胞来源于63岁成【chéng】年高加【jiā】索地区男性的【de】前【qián】列腺【xiàn】癌细胞在淋巴结【jié】的转移灶。
 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
准备【bèi】 RPIVM-1640 培【péi】养基(RPIVM-1640:GIBCO,添加 0.005 mg/ml 胰岛 素，0.01mg/ml转铁蛋白，lOnMbeta-雌二醇，5%胎牛血清。

2)培【péi】养条件：气【qì】相【xiàng】：空气，95%;二氧化碳，5%。温度：37摄氏度【dù】，培养箱【xiāng】湿度为70%-80%。
3)冻存液：90%*培养【yǎng】基，10%DMSO，现用现配。液氮【dàn】储【chǔ】存。
 
二.细胞处理：
1.复苏细【xì】胞：将含有lmL细胞悬液的冻存管在【zài】37°C水【shuǐ】浴中【zhōng】迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀【yún】。在【zài】1000RPM条【tiáo】件【jiàn】下离心4分钟，弃去上清液，补加【jiā】l-2mL培养基后吹匀。然后将所有【yǒu】细胞悬液加入培【péi】养瓶中培【péi】养【yǎng】过夜（或将 细胞悬【xuán】液加入l〇cm皿中，加入【rù】约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

2.细胞传【chuán】代：如果细胞密度达80%-90%，即可【kě】进行传【chuán】代培养。对于贴壁【bì】细胞，传代可参考以下方【fāng】法：弃去培【péi】养上清，用【yòng】不【bú】含钙【gài】、镁离子的PBS润洗细胞9-21次。力【lì】口【kǒu】 2m丨消化【huà】液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于【yú】培养瓶中，置【zhì】于37°C培养箱【xiāng】中消化9-21分钟，然后在显微镜下观察细胞消【xiāo】化情况【kuàng】，若细胞大部分变圆并【bìng】脱落【luò】，迅速拿回操作台【tái】，轻敲几【jǐ】下培养【yǎng】瓶后加少【shǎo】量培养【yǎng】基终止消【xiāo】化。按6-8ml/瓶补【bǔ】加培养基，轻轻打匀后吸【xī】出，在1000RPM条【tiáo】件【jiàn】下离心4分钟，弃去上清液，补加l-2mL培养液【yè】后吹匀【yún】。将细胞【bāo】悬液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中。

3.细胞【bāo】冻存【cún】：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴【tiē】壁【bì】细胞【bāo】冻存时，弃去【qù】培【péi】养【yǎng】基后加入【rù】少【shǎo】量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约lml含血清的培【péi】养【yǎng】基后加入冻【dòng】存管中，再添加1〇%DMSO后进行冻存。 

神经内分泌前列腺癌细胞(NCI-H660)注意事项：
收到细【xì】胞后【hòu】，若发现干冰己挥发干【gàn】净、冻存管【guǎn】瓶盖脱落、破【pò】损及细胞有【yǒu】污染，请立即与我们电联。
所有动【dòng】物【wù】细【xì】胞均视为有潜在的生物危害性，必须在【zài】二【èr】级【jí】生【shēng】物【wù】安全台内操【cāo】作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞【bāo】的器皿需要灭菌后方能丢弃瓶中。

 
细胞特性：
1)来源：前列腺癌，淋巴结转移
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
神经内分泌前列腺癌细胞(NCI-H660)运输和保存【cún】：使用含【hán】有胎牛血清的【de】2ml冻存【cún】管发送存活细胞。收到【dào】细胞后，可【kě】在1000RPM，常温【wēn】条【tiáo】件下，离心5min后，于洁净操【cāo】作台弃去上清，加【jiā】入推荐使用【yòng】的培养基后转移至l〇cm培养皿或【huò】者【zhě】T25培【péi】养瓶中培养，传代达到细胞生【shēng】长【zhǎng】状态良好时【shí】，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

细胞用途：仅供使用。