人肺鱗癌细胞（NCI-H1703）

人肺鱗癌细胞(NCI-H1703)
细胞介绍：
该细胞1987年建系【xì】，源【yuán】自一位54岁【suì】患有【yǒu】非【fēi】小细胞肺癌的白人男性，该患者为吸【xī】烟者。
 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备【bèi】 RPIVM-1640 培养【yǎng】基(RPMI-1640:GIBCO)，85%;胎牛血清，15%。
2.培养条件：气相：空气，95%;二氧化【huà】碳，5%。温度【dù】：37摄氏度【dù】，培养箱湿度为70%-80%。
3.冻【dòng】存液【yè】：90%培养基，10%DMSO，现用现配【pèi】。液氮储存【cún】。
 
2)细胞处理：
复苏细胞：将含有lmL细【xì】胞悬液【yè】的【de】冻【dòng】存管在37°C水浴中迅速摇晃解冻【dòng】，加入4mL培养基混【hún】合均匀【yún】。在1000RPM条【tiáo】件【jiàn】下离心4分钟，弃去上清液，补加l-2mL培养基【jī】后吹匀。然后将所有细【xì】胞悬液加入培养瓶【píng】中培【péi】养【yǎng】过夜（或将【jiāng】细胞【bāo】悬液加【jiā】入l〇cm皿【mǐn】中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人肺鱗癌细胞(NCI-H1703)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃【qì】去培养上清，用不含钙、镁【měi】离【lí】子【zǐ】的PBS润洗细胞【bāo】9-21次。力口2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培【péi】养瓶中【zhōng】，置于37°C培【péi】养箱中消化9-21分钟【zhōng】，然后在显微镜【jìng】下观察细胞消化情况，若细【xì】胞大部分变圆并脱落，迅【xùn】速拿回操作【zuò】台，轻敲几下培【péi】养瓶后【hòu】加【jiā】少量培养基【jī】终止【zhǐ】 消化。按6-8ml/瓶补加培养【yǎng】基，轻轻打匀【yún】后吸出，在1000RPM条件下离心【xīn】4分【fèn】钟，弃【qì】去上清液，补【bǔ】加l-2mL培养液后【hòu】吹【chuī】匀。将细【xì】胞悬液按1: 2到【dào】1: 5的比例分到新的【de】含8ml培养基的新皿中【zhōng】或者瓶中。

 
细胞冻存：待【dài】细胞生长状态良好时，可进行细胞冻【dòng】存【cún】。贴壁细胞冻存时，弃去【qù】培养基【jī】后【hòu】加入少【shǎo】量胰酶，细胞变【biàn】圆脱【tuō】落后，加入约lml含血清的培【péi】养基后【hòu】加入冻存管【guǎn】中【zhōng】，再添加1〇%DMSO后进行【háng】冻存【cún】。

 
注意事项：
收到细胞后【hòu】，若发现干冰己挥发干【gàn】净、冻存管瓶【píng】盖脱落【luò】、破损及细胞有污染，请立【lì】即与我们电联【lián】。
所有动物【wù】细【xì】胞均视为有【yǒu】潜【qián】在的生【shēng】物危害【hài】性，必须在二级生物安【ān】全台内操作，并请注意防护，所有废液【yè】及接触过此细胞的【de】器皿需要灭菌后方能丢弃。

 
细胞特性：
1)来源：肺癌
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人肺鱗癌细胞(NCI-H1703)运输和保存：使用含有【yǒu】胎牛血【xuè】清【qīng】的2ml冻存管发送存活细胞。收到细胞后，可在1000RPM，常【cháng】温条件下，离【lí】心5min后【hòu】，于洁净【jìng】操作台弃去上清，加【jiā】入【rù】推荐使用的培养【yǎng】基后转移至l〇cm培养皿或者【zhě】T25培养瓶【píng】中培养，传代达到细胞【bāo】生长【zhǎng】状态良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

细胞用途：仅供使用。