人肾癌细胞（0S-RC-2）

人肾癌细胞(0S-RC-2)
细胞介绍：
细胞来源于日本人的肾脏肿瘤细胞，可以移植到裸鼠。
 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 RPIVM-1640 培【péi】养【yǎng】基【jī】(RPIVM-1640:GIBCO,添加 NaHC031.5g八, D-葡萄糖2.5g八，丙酮酸钠O.llg八)，90%;胎牛血清，10%。

2.培养条件：气相【xiàng】：空气，95%;二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱【xiāng】 湿【shī】度【dù】为70%-80%。
3.冻存液：90%*培养基【jī】，10%DMSO,现用【yòng】现配。液【yè】氮储【chǔ】存。
 
2)细胞处理：
复苏细胞：将含有【yǒu】lmL细胞悬【xuán】液的冻存【cún】管在37°C水【shuǐ】浴【yù】中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基【jī】混合均匀。在1000RPM条【tiáo】件下离心4分钟，弃【qì】去上清液，补【bǔ】加l-2mL培【péi】养基后吹匀【yún】。然后【hòu】将【jiāng】所有细胞【bāo】悬液加入培养瓶中培养过夜（或将 细胞悬液加【jiā】入l〇cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检 查细胞密度。

 
人肾癌细胞(0S-RC-2)细胞传【chuán】代：如【rú】果细【xì】胞【bāo】密度达80%-90%，即【jí】可进行传代培养。弃去培养上清【qīng】，用不含钙【gài】、镁离【lí】子的PBS润洗细胞9-21次。力口2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培【péi】养瓶中【zhōng】，置于37°C培养箱中消化9-21分钟，然后【hòu】在显微【wēi】镜下观察细胞【bāo】消化情况【kuàng】，若细胞大部 分【fèn】变圆并脱落，迅【xùn】速拿回操作台，轻【qīng】敲几下培养瓶【píng】后加少量培养基终止消化。按【àn】6-8ml/瓶补【bǔ】加【jiā】培养基，轻轻打【dǎ】匀后吸出【chū】，在【zài】1000RPM条件下离心4分【fèn】钟，弃去上清液，补加l-2mL培养液【yè】后吹匀【yún】。将细胞悬液按【àn】1: 2到【dào】1: 5的比例分到【dào】新【xīn】的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

 
细胞冻存：待细胞生【shēng】长状态良好时，可进行【háng】细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后【hòu】加入少量胰酶，细胞【bāo】变圆脱【tuō】落【luò】后【hòu】，加【jiā】入【rù】约【yuē】lml含血清的【de】培【péi】养基后【hòu】加入冻存管中，再添加1〇%DMSO后进【jìn】行冻存。

 
注意事项：
收到细胞【bāo】后，若发【fā】现干【gàn】冰【bīng】己挥发【fā】干净、冻存管瓶【píng】盖脱落、破损及【jí】细【xì】胞有污染，请立即与我们电联。
所有动物细胞【bāo】均视为【wéi】有潜在的生物危【wēi】害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护【hù】，所【suǒ】有【yǒu】废液【yè】及接触【chù】过此细【xì】胞的【de】器皿需要灭菌后方能丢弃。

 
细胞特性：
1)来源：肾
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人肾癌细胞(0S-RC-2)运输【shū】和保存：可选择【zé】干冰运输及发送复苏存活细胞【bāo】方式：（1)干冰【bīng】运输【shū】，收到后【hòu】 立即转入液氮冻存或直【zhí】接复【fù】苏；（2)存活细胞，收到后应继【jì】续生【shēng】长，传代达到细胞生长状态良好时，再【zài】进【jìn】行冻存。具体操作见细胞培养步骤【zhòu】。

细胞用途：仅供使用。