人肺癌细胞（PC9）

人肺癌细胞(PC9)
细胞介绍：
这是一株肺癌细胞，具有EGFR19位外显子突变。
 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备DMEM培养基(DMEM，GIBCO)，90%;北美【měi】胎牛【niú】血清 (United States，GIBCO)，10%。
2.培养条件：气相：空气，95%;二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养【yǎng】箱湿【shī】度为【wéi】70%-80%。
3.冻存液：90%*培养基【jī】，10%DMSO,现用【yòng】现配。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏细胞：将含有【yǒu】lmL细【xì】胞悬液的冻存管在37°C水浴中迅速摇【yáo】晃解冻，加入4mL培【péi】养基混合均【jun1】匀。在【zài】1000RPM条【tiáo】件下离心【xīn】4分钟【zhōng】，弃去【qù】上【shàng】清液，补加【jiā】l-2mL培【péi】养基后吹匀。然后将所有细胞悬【xuán】液加【jiā】入培养【yǎng】瓶中培【péi】养过【guò】夜（或将细胞悬液加入l〇cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人肺癌细胞(PC9)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培【péi】养上清【qīng】，用【yòng】不含钙、镁离子的PBS润洗【xǐ】细胞9-21次。力口2m丨【shù】消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶【píng】中，置于37°C培养箱中消化9-21分钟，然【rán】后在显微镜下观【guān】察细【xì】胞【bāo】消化情况，若细【xì】胞大【dà】部分变圆并脱落，迅速拿回操作【zuò】台，轻【qīng】敲【qiāo】几下【xià】培养瓶后加少量【liàng】培养基终止消化。按6-8ml/瓶补【bǔ】加培养基【jī】，轻轻【qīng】打匀后吸出，在【zài】1000RPM条【tiáo】件下离心4分【fèn】钟【zhōng】，弃去上清液，补加l-2mL培养液后【hòu】吹匀。将细胞悬液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培【péi】养【yǎng】基【jī】的新【xīn】皿中或者瓶【píng】中。

 
细胞冻存：待细胞生长状态良好【hǎo】时，可进【jìn】行细胞冻存【cún】。贴壁细胞冻【dòng】存时，弃去培养基【jī】后加入【rù】少量胰酶【méi】，细胞变圆脱落后，加入约lml含血清的培养【yǎng】基【jī】后加入【rù】冻存【cún】管中，再添【tiān】加【jiā】1〇%DMSO后进行冻存。

 
注意事项：
收到【dào】细【xì】胞【bāo】后，若发现干【gàn】冰己挥发干【gàn】净、冻存【cún】管瓶盖脱落、破损及细胞有污染【rǎn】，请立即与我们电联。
所【suǒ】有动物细胞【bāo】均【jun1】视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注【zhù】意防护，所【suǒ】有【yǒu】废液【yè】及接触【chù】过此【cǐ】细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

 
细胞特性：
1)来源：肺癌
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人肺癌细胞(PC9)运【yùn】输和【hé】保存：使用含【hán】有胎牛血清【qīng】的2ml冻【dòng】存管发送存活细胞。收【shōu】到【dào】细胞后， 可在【zài】1000RPM，常温条件下，离心5min后，于洁净操作台弃去【qù】上清，加【jiā】入推荐【jiàn】使【shǐ】用的【de】培养【yǎng】基后转移至l〇cm培养皿或者T25培养瓶中培养【yǎng】，传【chuán】代达到细胞生【shēng】长【zhǎng】状态良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

细胞用途：仅供使用。