人肝细胞 （QSG-7701）

人肝细胞 (QSG-7701)
细胞介绍：
该细胞系来自35岁女性的肝癌癌旁组织。
 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 RPIVM-1640 培养基(RPMI-1640:GIBCO)，90%;北美胎【tāi】牛血清(United States，GIBCO)，10%。

2. 培养条件：气【qì】相：空【kōng】气，95%;二氧化碳【tàn】，5%。温度【dù】：37摄【shè】氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3.冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏细胞：将【jiāng】含有lmL细胞【bāo】悬液的冻【dòng】存管迅速放【fàng】入37°C水浴【yù】中（水面要【yào】低于冻【dòng】存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好【hǎo】的含有4mL培养【yǎng】基【jī】的15ml离心【xīn】管【guǎn】中混合均匀。在1000RPM条件下离心【xīn】4分钟，弃去上清液【yè】，加入lmL培养基后吹匀【yún】。然后将所【suǒ】有细胞【bāo】悬【xuán】液移入含有5ml培养基的培养瓶中【zhōng】培养过【guò】夜。第【dì】二【èr】天换液并检查细胞【bāo】密度。

细胞传代：如果细胞 密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人肝细胞 (QSG-7701)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃【qì】去培【péi】养上清，用【yòng】不含钙、镁离【lí】子的PBS润洗细胞9-21次。力【lì】口2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中，置于37°C培【péi】养箱中消化9-21分钟【zhōng】，然后在显微镜【jìng】下观察细【xì】胞【bāo】消化情况，若细胞大部分变【biàn】圆并脱落，迅速拿回操【cāo】作【zuò】台【tái】，轻敲几下培养瓶后加入3ml此细【xì】胞的培养【yǎng】基终止消【xiāo】化。轻轻吹打后吸出，移入【rù】15ml离【lí】心管中，在1000RPM条件【jiàn】下离【lí】心4分钟【zhōng】，弃去上清液，加入lmL培【péi】养液后吹匀。移入【rù】到事先准备好的含有【yǒu】5ml培养基的T-25培养【yǎng】瓶【píng】中或含有14ml培【péi】养基的T-75培养【yǎng】瓶中【zhōng】培养。 

细胞冻【dòng】存：待细胞生长状态【tài】良【liáng】好时，可进【jìn】行细胞冻存。贴壁细【xì】胞冻【dòng】存时，先【xiān】要消【xiāo】化处理【lǐ】并【bìng】进行细胞计数。消化方法按照细胞传代方法的9-21步骤进行，后的重悬液使用【yòng】血清。加DMSO至终浓度为10%。加入【rù】DMSO后【hòu】迅速混匀，按【àn】每lml的【de】数【shù】量分配到冻【dòng】存管中。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。

 注意事项：收【shōu】到细胞后，若发【fā】现【xiàn】干冰己挥发干净【jìng】、冻【dòng】存管瓶【píng】盖脱落、破损及细【xì】胞有污染，请立即与我们电联。

所有动物细胞均【jun1】视为【wéi】有【yǒu】潜在的【de】生【shēng】物危害性，必须在二级【jí】生【shēng】物安全台内【nèi】操作，并请注【zhù】意防护，所有废液及接触过此【cǐ】细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

 细胞特性：
1)来源：肝脏
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人肝细胞 (QSG-7701)运输和【hé】保存：可选【xuǎn】择【zé】干冰运输及【jí】发送复【fù】苏【sū】存活细胞方式：（1)干【gàn】冰运输【shū】，收到后立即转入液氮冻【dòng】存或直接复苏；（2)存活细胞，收到后应继【jì】续生长，传【chuán】代达到细胞生长状态良好时，再进行【háng】冻存【cún】。具体操作见细胞培养【yǎng】步【bù】骤。

细胞用途：仅供使用。