淋巴瘤细胞 （Raji）

淋巴瘤细胞 (Raji)
细胞介绍：
淋巴【bā】母细胞样的Raji细胞株源自【zì】一【yī】位11岁黑人男孩的左上【shàng】颌骨的【de】Burkitt淋巴瘤。EBNA阳性【xìng】。
 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 RPIVM-1640 培养基【jī】(RPMI-1640:GIBCO)，90%;胎牛【niú】血【xuè】清，10%。
2.培养条件：气【qì】相：空气，95%;二氧化碳，5%。温度：37摄氏【shì】度，培养【yǎng】箱湿度为【wéi】70%-80%。
3.冻存液：90%*培养【yǎng】基，10%DMSO,现用现配【pèi】。液【yè】氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏【sū】细胞：将含【hán】有lmL细胞悬液【yè】的冻存管【guǎn】在37°C水浴【yù】中迅速摇【yáo】晃解冻【dòng】，加入4mL培养基混合均匀【yún】。在1000RPM条件下【xià】离心4分钟，弃去上【shàng】清液，补加l-2mL培养【yǎng】基后吹匀。然【rán】后将所有细胞悬液【yè】加【jiā】入培养瓶中培养过夜（或将细胞【bāo】悬【xuán】液【yè】加入【rù】l〇cm皿中，加【jiā】入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。 

淋巴瘤细胞 (Raji)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培【péi】养上清，用【yòng】不含钙、镁离【lí】子的PBS润洗细胞9-21次。力口2m丨【shù】消【xiāo】化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中，置【zhì】于37°C培养箱中消【xiāo】化9-21分钟，然后在【zài】显微镜下【xià】观察细胞消化情况【kuàng】，若【ruò】细胞大部分变圆并脱【tuō】落【luò】，迅速拿回操作台，轻【qīng】敲几下培养瓶后加少量【liàng】培【péi】养基【jī】终止消化。按6-8ml/瓶补加培养基，轻【qīng】轻打匀【yún】后吸【xī】出，在1000RPM条件下离心4分【fèn】钟，弃去上清液，补加l-2mL培养液【yè】后吹【chuī】匀。将细胞悬液【yè】按1: 2到1: 5的比【bǐ】例【lì】分到新的含8ml培养基【jī】的新【xīn】皿【mǐn】中或者瓶中。 

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方【fāng】法一：收集细胞，1000RPM条件下【xià】离【lí】心4分钟，弃【qì】去上清液，补【bǔ】加l-2mL 培养液后吹匀，将细胞悬液按1: 2到【dào】1: 5的比例【lì】分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

方法二：可选择半【bàn】数换液方式，弃去半数【shù】培养基后，将剩余细胞悬起，将细 胞悬液【yè】按【àn】1: 2到1: 3的比【bǐ】例【lì】分到新【xīn】的含8ml培养【yǎng】基的新皿中或者瓶中。 

细胞【bāo】冻存：待细胞生长状态良好时，可【kě】进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养【yǎng】基后加入少量【liàng】胰酶，细【xì】胞变圆【yuán】脱落【luò】后，加【jiā】入约lml含血清【qīng】的培养基后 加入冻存管【guǎn】中，再添加【jiā】1〇%DMSO后进行冻存【cún】。悬浮【fú】细胞冻存时，应【yīng】将细胞收集，1000RPM条件下离心4分【fèn】钟，少量保【bǎo】存上【shàng】清液（防止细胞吸走【zǒu】)，加 入部分新鲜培【péi】养基，加【jiā】入【rù】到冻存管中，在冻【dòng】存管中加【jiā】入1〇%DMSO后进行冻存。 

注意事项：
收到细胞后，若发现干冰己挥发【fā】干净、冻存管【guǎn】瓶盖脱落、破【pò】损及细胞有污【wū】染，请立即与我们【men】电联【lián】。
所有【yǒu】动物细胞均视【shì】为有潜【qián】在的生【shēng】物【wù】危害【hài】性，必须【xū】在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废【fèi】液及接触过此细【xì】胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。 

细胞特性：
1)来源：B淋巴细胞;Burkitt淋巴瘤
2)形态：淋巴母细胞
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
淋巴瘤细胞 (Raji)运输和保存：可选择【zé】干冰运输及发送复苏存活【huó】细胞方式：（1)干【gàn】冰运输，收到后立【lì】即转入液氮【dàn】冻存或直接复苏【sū】；（2)存【cún】活细胞，收到后【hòu】应继续生长，传代【dài】达到细胞生长【zhǎng】状态良【liáng】好时【shí】，再进行【háng】冻【dòng】存。具体操【cāo】作见细胞培养步骤。

细胞用途：仅供使用。