人B淋巴细胞瘤细胞（RAMOS）

人B淋巴细胞瘤细胞(RAMOS)
细胞介绍：
该细【xì】胞【bāo】来源于一位3岁的白人Burkitt淋【lín】巴瘤患者；EBV阴性；表达IL-4受体【tǐ】和低亲和性IgE受【shòu】体【tǐ】（CD23);分【fèn】泌IgM (lamda L);表达膜型和分泌型的免疫球蛋白。 

本公司的细胞培养操作规程，供参考
1)培养基及培养冻存条件准备：
准备【bèi】 RPIVM-1640 培养【yǎng】基（RPMI-1640，GIBCO)，90%;胎牛【niú】血清【qīng】，10%。
培养条件：气相：空气，95%;二氧【yǎng】化碳【tàn】，5%。温【wēn】度：37°C，培养箱湿度【dù】为【wéi】70%-80%。
冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
2)细胞处理：
复【fù】苏【sū】细胞：将含有lmL细胞悬液的【de】冻存管迅速【sù】放入【rù】37°C水浴【yù】中（水面要低于冻存【cún】管盖部）摇晃解【jiě】冻，移入事先准备好的含【hán】有4mL培养基的【de】15ml离心管中混【hún】合均匀【yún】。在1000RPM条件下离【lí】心4分钟，弃去上【shàng】清液【yè】，加入lmL培养基后吹匀。然后将所有【yǒu】细胞【bāo】悬液移入含有5ml培【péi】养基的培养瓶中【zhōng】培养【yǎng】过【guò】夜【yè】。第二天换液并检查细胞密度。

人B淋巴细胞瘤细胞(RAMOS)细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方【fāng】法一：收集细胞，1000RPM，常【cháng】温条件下离心【xīn】5分【fèn】钟，弃去上清液，补加l-2mL培养液【yè】后吹【chuī】句，将【jiāng】细【xì】胞悬液按1: 2到【dào】1: 5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

方【fāng】法【fǎ】二：可【kě】选择半数换液方式，弃去【qù】半数【shù】培养基后，将剩余【yú】细胞【bāo】悬起【qǐ】，将细 胞悬液按1: 2到1: 3的【de】比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

细胞冻存：待细胞生长【zhǎng】状态良【liáng】好时，可进行细【xì】胞冻存。悬【xuán】浮细胞【bāo】冻存时，应将细【xì】胞收集，1000RPM，常温条件下离心5分钟【zhōng】，少量【liàng】保存上清液（防止细胞吸走)，加入部【bù】分新鲜培养基，吹打均匀后【hòu】，加入到冻存管【guǎn】中【zhōng】，在冻存【cún】管中加【jiā】入【rù】10%DMSO摇匀后进行冻【dòng】存。

注意事项：
收到细胞后，若发【fā】现干冰【bīng】己【jǐ】挥【huī】发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有【yǒu】污染，请立即【jí】与我【wǒ】们电联【lián】。
所有动物【wù】细胞均视为有【yǒu】潜在【zài】的生物危害【hài】性【xìng】，必须在二级生物安【ān】全台内操作，并【bìng】请【qǐng】注【zhù】意防护【hù】，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。 

细胞特性：
1)来源：血液
2)形态：淋巴母细胞样，悬浮生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装

人B淋巴细胞瘤细胞(RAMOS)细胞接受后的处理：
1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2.请【qǐng】先在【zài】显【xiǎn】微镜【jìng】下【xià】确认细胞生长状【zhuàng】态，去掉封口膜并【bìng】将T25瓶置于37°C培养约 2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4.如果【guǒ】细胞【bāo】长满（90%以上）请及时进【jìn】行细胞传代，传代培养用6ml本公【gōng】司附带的【de】*培养基。
5.接到细胞次日【rì】，请检【jiǎn】查【chá】细胞是否污染，若【ruò】发【fā】现【xiàn】污染或疑似【sì】污染，请及【jí】时与我们取得电联。
细胞用途：仅供使用。