人子宫内膜癌细胞（RL95-2）

人子宫内膜癌细胞(RL95-2)
细胞介绍：
该细胞系源【yuán】自一名65岁白人女【nǚ】性【xìng】子宫内膜腺癌【ái】组织，1983年由DL Way建系。该【gāi】细胞【bāo】表达a-角蛋白，细【xì】胞【bāo】表面【miàn】具有微绒毛。
 
本公司的细胞培养操作规程，供参考
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准【zhǔn】备【bèi】 DMEM/F12 培养基(DMEM/F12:GIBCO)，90%;胎牛血清，10%。
2.培养条件【jiàn】：气相：空气，95%;二【èr】氧【yǎng】化碳，5%。温度：37°C，培养箱湿度为 70%-80%。
3.冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配液氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏细胞：将【jiāng】含有lmL细【xì】胞悬液的冻存管迅速【sù】放入【rù】37°C水【shuǐ】浴中（水面要【yào】低【dī】于冻存管【guǎn】盖部【bù】）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培【péi】养基的15ml离心管中混合均【jun1】匀。在【zài】1000RPM条件下【xià】离心4分钟，弃去【qù】上清【qīng】液，加入lmL培 养基后【hòu】吹【chuī】匀。然后将【jiāng】所有细胞悬液移【yí】入含有5ml培养基的培养瓶中【zhōng】培【péi】养过【guò】夜。第二天换液【yè】并检查【chá】细胞密度。

细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人子宫内膜癌细胞(RL95-2)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃【qì】去【qù】培养上清，用不含钙、镁离子【zǐ】的PBS润洗细胞【bāo】9-21次。力口2m丨消化液【yè】（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养【yǎng】瓶中，置于【yú】37°C培养箱【xiāng】中消【xiāo】化9-21分钟，然后【hòu】在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大【dà】部【bù】分变圆并脱落【luò】，迅速拿回操作【zuò】台，轻敲【qiāo】几下【xià】培【péi】养瓶后加入3ml此【cǐ】细胞的 培【péi】养基终止消化【huà】。轻轻吹打后吸出，移入15ml离心管中【zhōng】，在【zài】1000RPM条件【jiàn】下离心4分钟，弃【qì】去上【shàng】清液，加入lmL培养液后吹【chuī】匀。移入【rù】到事先准备好【hǎo】的含有【yǒu】5ml培养基的T-25培养瓶中或含【hán】有14ml培养基的【de】T-75培养瓶【píng】中培养。 

细胞冻存：待细【xì】胞生长状态良好【hǎo】时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存【cún】时，先要消【xiāo】化处理并进行【háng】细胞计【jì】数。消化方法按【àn】照细胞传【chuán】代方法的【de】9-21步骤进行，后的重悬液使【shǐ】用血清。悬浮【fú】细胞【bāo】直接计数后离心，用【yòng】血清重【chóng】悬浮，加DMSO至终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按【àn】每lml的数量分【fèn】配到冻存管中。本【běn】公【gōng】司按每个冻存管细胞【bāo】数【shù】目大于1X106个细胞冻【dòng】存。 

注意事项：
收到细胞后，若发现干冰【bīng】己挥【huī】发干【gàn】净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请【qǐng】立【lì】即与【yǔ】我【wǒ】们电联。
所有【yǒu】动物细【xì】胞均视为有潜【qián】在【zài】的生【shēng】物【wù】危害性，必须【xū】在【zài】二级生物安全台内操作，并请注【zhù】意防护，所有废液及接触过此细胞【bāo】的器皿需要灭菌后方能丢弃。

 细胞特性：
1)来源：子宫内膜腺癌
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人子宫内膜癌细胞(RL95-2)细胞接受后的处理：
1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2.请先在显微【wēi】镜下确认细胞生长【zhǎng】状【zhuàng】态，去【qù】掉封口膜并【bìng】将【jiāng】T25瓶置于37°C培养约【yuē】2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4.如果细【xì】胞长【zhǎng】满（90%以【yǐ】上）请【qǐng】及时【shí】进行细【xì】胞传代，传代培养用6ml本公司附【fù】带的【de】*培养基。
5.接【jiē】到细胞【bāo】次日，请检【jiǎn】查细胞【bāo】是否污染，若发现污染或【huò】疑似污染，请及【jí】时与我们取得电联。
细胞用途：仅供使用。