膀胱移行细胞癌细胞（RT112）

膀胱移行细胞癌细胞(RT112)
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 RPIVM-1640 培养基(RPIVM-1640:GIBCO,添加 NaHC031.5g八, D-葡【pú】萄糖2.5g八，丙【bǐng】酮【tóng】酸钠O.llg八)，90%;胎【tāi】牛【niú】血清，10%。
2.培【péi】养条件：气相：空气，95%;二氧【yǎng】化碳，5%。温度：37摄氏【shì】度，培【péi】养箱湿度为【wéi】70%-80%。
3.冻存液：90%*培养【yǎng】基，10%DMSO,现用现配。液【yè】氮储存【cún】。
 
2)细胞处理：
复苏细胞：将含有【yǒu】lmL细胞【bāo】悬液的冻存管在37°C水浴中迅【xùn】速摇【yáo】晃解冻【dòng】，加入4mL培【péi】养基混【hún】合均匀【yún】。在1000RPM条件【jiàn】下离心4分【fèn】钟，弃【qì】去上【shàng】清液，补加【jiā】l-2mL培养基后吹匀。然后将所有【yǒu】细胞悬液加入培养瓶中【zhōng】培养过【guò】夜【yè】（或将细胞悬液【yè】加入l〇cm皿【mǐn】中，加入约8ml培养【yǎng】基，培养过【guò】夜【yè】）。第二天换液并检查细胞密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
膀胱移行细胞癌细胞(RT112)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去【qù】培养上清，用【yòng】不含【hán】钙、镁离子的PBS润洗细胞【bāo】9-21次。力【lì】口2m丨消化【huà】液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶【píng】中，置于【yú】37°C培养箱中消化【huà】9-21分钟，然后在显微镜下观察细胞消【xiāo】化情【qíng】况，若【ruò】细胞大部分变圆【yuán】并【bìng】脱落，迅速拿回操作台【tái】，轻敲几下培养瓶后加少【shǎo】量培养基终止消化。按6-8ml/瓶【píng】补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件【jiàn】下【xià】离心4分【fèn】钟，弃去上清液【yè】，补加l-2mL培养【yǎng】液【yè】后吹匀。
4.将细胞悬液按【àn】1: 2到1: 5的【de】比例分到新的含8ml培养基【jī】的新皿【mǐn】中或者瓶中【zhōng】。

细胞冻【dòng】存：待细胞生长状态【tài】良好时，可进行细胞冻存【cún】。贴壁细胞冻存时，弃【qì】去培养【yǎng】基后加入少量胰【yí】酶，细【xì】胞【bāo】变圆脱落后，加【jiā】入约lml含血清的【de】培养基后加入冻【dòng】存【cún】管中，再添加1〇%DMSO后进行冻存。
 
注意事项：
收【shōu】到细胞后，若发现【xiàn】干冰己挥发干【gàn】净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有【yǒu】污染【rǎn】，请立即与我们电联【lián】。
所有动物细胞均视为【wéi】有潜在的生【shēng】物危害性，必须在二【èr】级生【shēng】物安全台内【nèi】操【cāo】作，并【bìng】请注意防【fáng】护，所有废液及接触过此细胞【bāo】的器皿需要灭菌【jun1】后方能【néng】丢弃。
 
细胞特性：
1)来源：膀胱癌
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
膀胱移行细胞癌细胞(RT112)运输和保【bǎo】存：使用含有胎牛血清的2ml冻存管发送存【cún】活细胞【bāo】。收到细胞【bāo】后【hòu】，可在【zài】1000RPM，常温条件下，离心5min后，于洁净操作台弃去上清，加入推荐使用的培养基后【hòu】转移至【zhì】l〇cm培养【yǎng】皿或者T25培养瓶中【zhōng】培养【yǎng】，传代达到【dào】细胞生长状态【tài】良好时，再进行【háng】冻存。具体操作见【jiàn】细胞【bāo】培养步骤【zhòu】。
细胞用途：仅供使用。