人舌鱗癌细胞（SCC-9）

人舌鱗癌细胞(SCC-9)
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 DMEM/F12 培【péi】养基【jī】(DMEM/F12，GIBCO)，90%;胎牛血清。
2.培养【yǎng】条件：气相【xiàng】：空气，95%;二氧化碳【tàn】，5%。温度：37摄氏度，培【péi】养箱湿度为【wéi】70%-80%。
3.冻存【cún】液：90%*培【péi】养基，10%DMSO,现用现配。液【yè】氮【dàn】储存。
 
2)细胞处理：
复【fù】苏【sū】细胞【bāo】：将含【hán】有lmL细胞悬液【yè】的冻存管在37°C水浴中迅速摇晃解冻，加入【rù】4mL培【péi】养【yǎng】基混合均匀【yún】。在1000RPM条【tiáo】件下离心4分钟，弃去上清液【yè】，补【bǔ】加l-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞【bāo】悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞【bāo】悬液加入l〇cm皿中，加【jiā】入约【yuē】8ml培养基，培养【yǎng】过夜）。第二天换液并【bìng】检查【chá】细胞密【mì】度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 

人舌鱗癌细胞(SCC-9)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去【qù】培养上清，用不含钙、镁离【lí】子的PBS润【rùn】洗细胞【bāo】9-21次。力口2m丨消【xiāo】化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中，置于37°C培养箱中消化9-21分钟，然后在显微【wēi】镜下观【guān】察细【xì】胞【bāo】消【xiāo】化情况，若细胞大部分【fèn】变圆并脱落，迅速拿【ná】回操作台，轻敲几下【xià】培养瓶后加少量培养基终【zhōng】止消化。按【àn】6-8ml/瓶补加培养基，轻【qīng】轻【qīng】打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分【fèn】钟，弃去上清液【yè】，补加l-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1: 2到1: 5的比例分【fèn】到新【xīn】的含8ml培【péi】养基的【de】新皿中或者瓶中【zhōng】。
 
细胞冻存：待细胞生长【zhǎng】状态良好时，可进【jìn】行细胞【bāo】冻存。贴【tiē】壁细胞【bāo】冻存时，弃【qì】 去【qù】培【péi】养基后加入少量【liàng】胰酶【méi】，细胞变圆【yuán】脱落后，加入约lml含血清的培养【yǎng】基后 加入冻存管中，再添加【jiā】1〇%DMSO后【hòu】进行冻【dòng】存。
 
注意事项：
收到细胞【bāo】后，若发现干【gàn】冰己挥发【fā】干【gàn】净、冻存管瓶盖【gài】脱落【luò】、破损及细胞有污染，请立即【jí】与我们电联。
所【suǒ】有动物【wù】细胞均【jun1】视为有潜在的生物【wù】危害【hài】性，必须在二级【jí】生物安全台内操作【zuò】，并请注意防护，所有【yǒu】废液及接触过此细胞的器皿需【xū】要灭【miè】菌后方能丢【diū】弃。
 
细胞特性：
1)来源：舌
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 

人舌鱗癌细胞(SCC-9)运输和保【bǎo】存【cún】：使用含【hán】有【yǒu】胎牛血清【qīng】的2ml冻存管发送存活细胞【bāo】。收到【dào】细【xì】胞【bāo】后【hòu】，可在1000RPM，常温条件下【xià】，离心5min后，于洁净操【cāo】作【zuò】台弃去上清，加入推荐使用的培养基后转移至【zhì】l〇cm培养皿或者T25培养瓶中【zhōng】培养，传代达到细胞【bāo】生长状态良好时，再进行冻【dòng】存。具体操作见细胞培【péi】养步【bù】骤。
细胞用途：仅供使用。