人胃腺癌细胞（SGC-7901）

人胃腺癌细胞(SGC-7901)
细胞介绍：
这株细胞源自一位56岁女性胃腺癌患者的淋巴结转移。
 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备【bèi】 RPIVM-1640 培【péi】养基(RPMI-1640:GIBCO1)，90%;胎牛血清，10%。
2.培养条件：气相：空气【qì】，95%;二氧【yǎng】化碳，5%。温度：37摄【shè】氏度，培养箱 湿度为70%-80%。
3.冻存液：90%*培养基，10%DMSO,现用【yòng】现配。液氮【dàn】储【chǔ】存。
 
2)细胞处理：
复苏细【xì】胞：将含有lmL细胞【bāo】悬液的冻存管【guǎn】在37°C水【shuǐ】浴中迅速摇晃解冻【dòng】，加入4mL培养基【jī】混合均匀。在【zài】1000RPM条【tiáo】件下离心4分钟【zhōng】，弃【qì】去上【shàng】清液，补加l-2mL培养基后吹匀。然后【hòu】将所有细胞悬液加入培养瓶【píng】中【zhōng】培养过夜（或将细胞【bāo】悬液加入l〇cm皿中，加入约【yuē】8ml培养基【jī】，培养过夜【yè】）。第二天换液并检查细胞密度【dù】。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人胃腺癌细胞(SGC-7901)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃【qì】去培养上清，用不【bú】含钙、镁【měi】离子的PBS润【rùn】洗细【xì】胞9-21次。力口2m丨消【xiāo】化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中，置【zhì】于37°C培养箱中消化9-21分钟，然后在【zài】显【xiǎn】微镜下观【guān】察细胞消化情况，若【ruò】细胞大部分变【biàn】圆并脱落，迅速拿回【huí】操【cāo】作【zuò】台，轻【qīng】敲几下培养瓶后【hòu】加少【shǎo】量培养【yǎng】基【jī】终【zhōng】止消化。按【àn】6-8ml/瓶补加培养【yǎng】基，轻轻打匀后吸出【chū】，在1000RPM条件下离心4分钟【zhōng】，弃去上清液，补加l-2mL培养液后吹匀。将细胞悬【xuán】液按1: 2到1: 5的比例分到新的含【hán】8ml培【péi】养基的新皿中或者瓶中。
细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可【kě】进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时【shí】，弃去培养【yǎng】基后加入少【shǎo】量胰【yí】酶，细【xì】胞【bāo】变圆脱落后，加入约lml含血清的培养基后加入【rù】冻存管中，再【zài】添加1〇%DMSO后【hòu】进行冻存。
 
注意事项：
收到【dào】细胞【bāo】后，若【ruò】发现干冰己挥发干净、冻存【cún】管瓶盖脱落【luò】、破损及细胞有污【wū】染【rǎn】，请立即与【yǔ】我们电联。
所有【yǒu】动物细胞均视【shì】为有潜在的【de】生物危害性，必须在二级【jí】生物【wù】安全台内操作，并请【qǐng】注意防【fáng】护，所有废【fèi】液及接【jiē】触过此细胞【bāo】的器【qì】皿需【xū】要灭菌后方能丢弃。
 
细胞特性：
1)来源：胃癌
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人胃腺癌细胞(SGC-7901)运输和【hé】保存：使【shǐ】用含有胎牛血清的2ml冻存【cún】管发送存活【huó】细胞。收到细胞后【hòu】，可在【zài】1000RPM，常温条件【jiàn】下，离心5min后，于【yú】洁净操【cāo】作台弃去上清，加【jiā】入推荐使用的培养基【jī】后转【zhuǎn】移至l〇cm培养皿或者T25培养瓶【píng】中培养，传代达到【dào】细【xì】胞生长 状态良好时【shí】，再进行冻存。具体操作见【jiàn】细胞培养步骤。
细胞用途：仅供使用。