人胃癌细胞（SNU216）

人胃癌细胞(SNU216)
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 RPIVM-1640 培养【yǎng】基(RPIVM-1640:GIBCO,添【tiān】加 NaHC031.5g八, D-葡萄糖2.5g八，丙酮酸钠【nà】O.llg八【bā】)，90%;胎牛血清，10%。
2.培养条件：气相：空气【qì】，95%;二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱【xiāng】湿度【dù】为70%-80%。
3.冻存液【yè】：90%*培养基，10%DMSO,现用现配。液【yè】氮储【chǔ】存。
 
2)细胞处理：
复苏细【xì】胞：将含【hán】有lmL细胞悬液【yè】的冻存管在37°C水浴中迅速摇晃【huǎng】解冻，加入4mL培养基【jī】混合【hé】均匀。在1000RPM条件下【xià】离【lí】心4分【fèn】钟【zhōng】，弃去【qù】上清液，补加l-2mL培【péi】养基后吹匀。然后将【jiāng】所【suǒ】有【yǒu】细胞【bāo】悬【xuán】液加入培养瓶【píng】中培【péi】养过夜（或将细胞悬液加入l〇cm皿中【zhōng】，加入约8ml培养基，培养过夜【yè】）。第二天换液并检查细【xì】胞密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人胃癌细胞(SNU216)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上清，用【yòng】不含钙【gài】、镁离子的PBS润【rùn】洗细胞9-21次【cì】。力口2m丨【shù】消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培【péi】养瓶中【zhōng】，置【zhì】于37°C培养箱中消化9-21分钟，然后在显微镜下观察细胞消化【huà】情【qíng】况【kuàng】，若细胞大部【bù】分变圆并脱落，迅速拿回操作【zuò】台，轻敲【qiāo】几下培养瓶后加少【shǎo】量培养基终【zhōng】止消化。按6-8ml/瓶【píng】补加【jiā】培养基，轻轻打【dǎ】匀后吸【xī】出【chū】，在1000RPM条件下离【lí】心4分钟【zhōng】，弃去上清液，补加l-2mL培【péi】养液后吹【chuī】匀【yún】。将细胞悬液按1: 2到【dào】1: 5的比例【lì】分到新的含8ml培养基的新皿中或【huò】者瓶中。
 
细胞冻存：待细胞生长状态良【liáng】好时，可进行细胞冻存。贴壁【bì】细胞【bāo】冻存时【shí】，弃【qì】去培养基后加入少量胰酶，细【xì】胞变【biàn】圆【yuán】脱落后，加【jiā】入约lml含血清的培养【yǎng】基【jī】后加【jiā】入【rù】冻存【cún】管中，再添加1〇%DMSO后进行冻存。
 
注意事项：
收到细胞后，若发【fā】现干冰己挥发【fā】干净【jìng】、冻存【cún】管瓶盖脱落、破损及【jí】细胞有【yǒu】污染，请立即与【yǔ】我【wǒ】们电联。
所有动物【wù】细【xì】胞均视为【wéi】有潜在的生物危害性，必须在二【èr】级生物【wù】安全台内操作，并【bìng】请注意防护【hù】，所【suǒ】有废液【yè】及接触过此细胞【bāo】的器皿需要灭菌后方能丢弃瓶中。
 
细胞特性：
1)来源：胃癌
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人胃癌细胞(SNU216)运输和【hé】保存：使用含【hán】有胎【tāi】牛血清的2ml冻【dòng】存管发送存活细胞。收到细胞后【hòu】，可在1000RPM，常温【wēn】条【tiáo】件下【xià】，离心5min后，于洁净操作台【tái】弃去上清，加入推荐使用的培养基后转【zhuǎn】移至l〇cm培【péi】养皿或者T25培【péi】养瓶中培养，传【chuán】代达到细胞生长【zhǎng】状态良好时，再进行冻存。具【jù】体操【cāo】作【zuò】见细胞培养步骤【zhòu】。
细胞用途：仅供使用。