小鼠小胶质细胞 （BV2）

小鼠小胶质细胞 (BV2)
细胞介绍
该【gāi】细胞来源于德国DSMZ (Germancollectionofmicroorganismsandcellcultures)，采集于【yú】小鼠脑小胶质【zhì】细【xì】胞瘤。
 
细胞特性
1)来源：小鼠脑
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
运输和保存：使【shǐ】用含有胎牛血清的2ml冻存【cún】管【guǎn】发【fā】送存活细胞。收到细胞后，可【kě】在【zài】1000RPM，常温【wēn】条【tiáo】件下，离心【xīn】5min后，于洁【jié】净【jìng】操作台弃去上清，加入推荐使用的培养基后转移【yí】至l〇cm培养皿或者T25培养瓶中培养，传代达到【dào】细胞生【shēng】长状【zhuàng】态【tài】良好时，再进行冻存。具体操作见细【xì】胞【bāo】培【péi】养步骤。
细胞用途：仅供使用。
 
小鼠小胶质细胞 (BV2)细胞培养步骤
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 DMEM 培养基(DMEM，GIBC0)，90%;胎牛【niú】血清【qīng】，10%。
2. 培养条件【jiàn】：气相：空气，95%;二【èr】氧【yǎng】化【huà】碳，5%。温度【dù】：37摄氏度。
3.冻【dòng】存液：90%*培养基，10%DMSO,现用现配。液【yè】氮储【chǔ】存。
2)细胞处理：
复苏细【xì】胞【bāo】：将含有lmL细胞悬液的冻存管在37°C水浴中迅速【sù】摇晃解冻，加入4mL培养【yǎng】基混合均匀。在【zài】1000RPM条件下【xià】离心4分钟【zhōng】，弃去上【shàng】清【qīng】液，补加l-2mL培养【yǎng】基后【hòu】吹匀。然后【hòu】将【jiāng】所有细【xì】胞悬液加入培养瓶中【zhōng】培养过【guò】夜（或将细胞【bāo】悬液加入l〇cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二【èr】天换【huàn】液【yè】并检 查细胞密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞9-22次。
力口2m丨消【xiāo】化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中【zhōng】，置于【yú】37°C培养箱中消化【huà】9-22分钟，然【rán】后在显微镜下观察细【xì】胞消化情【qíng】况，若【ruò】细【xì】胞大部分变【biàn】圆并脱落，迅速拿回【huí】操作台【tái】，轻敲几下培养瓶后【hòu】加【jiā】少量培养【yǎng】基终止 消化。
按6-8ml/瓶【píng】补加【jiā】培养基，轻轻打匀【yún】后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃【qì】去上【shàng】清液，补加l-2mL培【péi】养液后吹匀。
 
将细胞悬液按1: 2到1: 5的比【bǐ】例分【fèn】到【dào】新的含【hán】8ml培养基的新皿中【zhōng】或者瓶中。
细胞冻存：待细胞【bāo】生长状【zhuàng】态良好时，可进【jìn】行【háng】细胞【bāo】冻存。贴壁【bì】细【xì】胞【bāo】冻存时，弃 去培养基后【hòu】加入【rù】少【shǎo】量胰酶，细【xì】胞变圆脱落后，加入约lml含血清的培养基后【hòu】加入【rù】冻存管中，再添加1〇%DMSO后进【jìn】行冻存。
 
小鼠小胶质细胞 (BV2)注意事项：
收到细胞后，若【ruò】发【fā】现干冰己挥【huī】发干净、冻存管瓶【píng】盖脱落、破损【sǔn】及细胞有污染，请立【lì】即与我们电联【lián】。
所有动【dòng】物细胞【bāo】均【jun1】视为有潜在的【de】生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此【cǐ】细【xì】胞【bāo】的【de】器皿需要灭菌后方能【néng】丢弃。