小鼠结肠癌细胞 （CT26）

小鼠结肠癌细胞 (CT26)
细胞特性
1)来源：小鼠结肠癌
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
细胞接受后的处理：
1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2.请先在【zài】显微镜【jìng】下确认【rèn】细胞生长状态【tài】，去掉封【fēng】口膜并将T25瓶置于37°C培养约【yuē】 2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4. 如【rú】果细胞长满（90%以上）请【qǐng】及时进行细胞【bāo】传【chuán】代，传代培养用6ml本【běn】公司附【fù】 带的*培养基。
5.接【jiē】到细胞次日【rì】，请检查细【xì】胞是【shì】否污染【rǎn】，若发现污染或疑似污染，请及时【shí】与我 们【men】取得电联。
细胞用途：仅供使用。
 
小鼠结肠癌细胞 (CT26)本公司的细胞培养操作规程，供参考
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备RPIVM-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO)，90%;胎牛血【xuè】清，10%。
2.培【péi】养条【tiáo】件：气相：空气，95%;二氧化碳，5%。温度：37°C，培【péi】养【yǎng】箱湿度 为【wéi】 70%-80%。
3.冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
2)细胞处理：
复苏细胞：将含【hán】有lmL细胞【bāo】悬【xuán】液的冻存管【guǎn】迅速【sù】放入37°C水浴中（水面【miàn】要【yào】低 于冻存【cún】管盖【gài】部）摇晃解冻，移入事先准备好【hǎo】的含【hán】有4mL培养基【jī】的15ml离心 管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟【zhōng】，弃去上清液，加入lmL培 养【yǎng】基后吹【chuī】匀【yún】。然后将【jiāng】所有细胞悬【xuán】液移入含有5ml培养基的培【péi】养瓶中培养过【guò】夜。 第二天换液【yè】并检查细胞密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞9-22次。
力【lì】口 2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中，置【zhì】于37°C培养箱中消化9-22分钟【zhōng】，然后在显微镜下观察细胞消【xiāo】化情况，若细胞大部分变圆并脱【tuō】落，迅速拿【ná】回【huí】操【cāo】作台，轻敲【qiāo】几下【xià】培养瓶后加入3ml此【cǐ】细【xì】胞的培养基终止【zhǐ】消【xiāo】化。
轻轻吹【chuī】打后吸出，移入【rù】15ml离心管中，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去【qù】上清液，加入lmL培养液后吹【chuī】匀。
移入到事【shì】先准备【bèi】好的含有5ml培养基的T-25培【péi】养瓶中或【huò】含有14ml培养 基【jī】的T-75培养瓶中【zhōng】培【péi】养。
 
细胞冻存【cún】：待【dài】细【xì】胞生长状态良好【hǎo】时【shí】，可进行细胞冻存【cún】。贴壁细胞冻存时【shí】，先要消化处【chù】理【lǐ】并进行细胞计数。消化【huà】方法按照细胞传代方法的9-22步骤进行，后的【de】重悬液使用血清。悬浮细【xì】胞【bāo】直接计数后【hòu】离心，用血【xuè】清【qīng】重悬【xuán】浮，加DMSO至终浓度为10%。加【jiā】入DMSO后迅速混匀，按每lml的数量分配到冻【dòng】存管【guǎn】 中【zhōng】。本公司按每个【gè】冻存管【guǎn】细胞数目【mù】大于1X106个细【xì】胞冻存。
 
小鼠结肠癌细胞 (CT26)注意事项：
收到细胞后【hòu】，若【ruò】发现干冰己挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细【xì】胞有污【wū】染，请【qǐng】立【lì】即与我们电联。
所有动【dòng】物细胞均【jun1】视为【wéi】有潜在【zài】的生物【wù】危害性，必须在二级【jí】生物安全台内操作【zuò】，并请注意防护，所有废液及接【jiē】触过此细胞的器皿需要灭【miè】菌后【hòu】方能丢弃。