小鼠T淋巴瘤细胞（鸡OVA基因修饰）（E.G7-OVA）

小鼠T淋巴瘤细胞(鸡OVA基因修饰)(E.G7-OVA)
细胞介绍
该细胞1988年建系【xì】，源自C57BL/6 (H-2 b)小鼠【shǔ】的【de】经电转【zhuǎn】质粒pAc-neo-OVA的淋巴细胞系【xì】EL4。
 
细胞特性
1)来源：T淋巴细胞
2)形态：淋巴母细胞样，悬浮生长
3)含量：>lxl06个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
运输和保存：使用含有胎牛血清的【de】2ml冻存管发送存活细胞。收到细【xì】胞后，可在1000RPM，常温条件下，离心5min后，于【yú】洁净【jìng】操作台弃去上清，加入推荐使【shǐ】用的【de】培【péi】养基后转【zhuǎn】移【yí】至l〇cm培养皿或者T25培【péi】养瓶中培养，传代【dài】达到【dào】细胞生长状态良好【hǎo】时【shí】，再进行冻存。具体【tǐ】操【cāo】作见细胞培养【yǎng】步骤。
细胞用途：仅供使用。
 
小鼠T淋巴瘤细胞(鸡OVA基因修饰)(E.G7-OVA)细胞培养步骤
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准【zhǔn】备 RPIVM-1640培养基【jī】(RPIVM-1640:GIBCO,添【tiān】加【jiā】 NaHC031.5g八,D-葡萄糖4.5g八，丙酮酸【suān】钠O.llg八，lOmMHEPES，0.05mM(3-巯基乙醇，0.4 mg/mlG418)，90%;胎牛【niú】血清，10%。
2.培养【yǎng】条件：气【qì】相：空气【qì】，95%;二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱 湿度为70%-80%。
3.冻存液：90%*培养【yǎng】基，10%DMSO,现用现【xiàn】配。液氮储【chǔ】存。
2)细胞处理：
 
复苏【sū】细胞：将含有lmL细【xì】胞悬液的【de】冻存【cún】管在37°C水浴中迅速【sù】摇晃【huǎng】解冻，加入4mL培养基混【hún】合均匀。在【zài】1000RPM条件下离心4分【fèn】钟，弃去上清液，补加l-2mL培养基后吹【chuī】匀【yún】。然【rán】后将所【suǒ】有细【xì】胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞【bāo】悬液【yè】加【jiā】入l〇cm皿中，加【jiā】入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检【jiǎn】 查细胞【bāo】密度【dù】。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法【fǎ】一：收【shōu】集【jí】细胞【bāo】，1000RPM，常温条件下离心【xīn】5分钟，弃去上清液，补加l-2mL培养液后吹句【jù】，将【jiāng】细胞悬液按1: 2到1: 5的【de】比例【lì】分到新的【de】含8ml培养基的新皿中【zhōng】或者瓶中【zhōng】。
方法二：可选择半【bàn】数换液方式，弃去半【bàn】数培养基【jī】后，将剩余细胞悬【xuán】起【qǐ】，将细胞【bāo】悬液按1: 2到1: 3的比例分到新的含8ml培养【yǎng】基的新【xīn】皿中或者瓶中【zhōng】。
 
细【xì】胞冻存：待【dài】细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。悬浮细【xì】胞冻存时，应将细胞收【shōu】集，1000RPM，常温【wēn】条【tiáo】件下【xià】离心5分【fèn】钟，少量【liàng】保存上【shàng】清【qīng】液（防【fáng】止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基【jī】，吹打均匀后，加入到冻存管中，在冻存【cún】管中加【jiā】入10%DMSO摇【yáo】匀【yún】后进【jìn】行冻存。

小鼠T淋巴瘤细胞(鸡OVA基因修饰)(E.G7-OVA)注意事项：
收到细胞后，若发现干冰己挥发干【gàn】净、冻存管瓶盖脱落、破损及细【xì】胞有污【wū】染【rǎn】，请立即【jí】与我【wǒ】们电【diàn】联。
所有【yǒu】动物【wù】细胞均视为有潜在的生物危害【hài】性，必须在二级生物安全台【tái】内操作【zuò】，并【bìng】请注意防护，所有【yǒu】废液及【jí】接【jiē】触过此细【xì】胞的器皿需要灭菌【jun1】后方【fāng】能丢弃。