小鼠脑神经胶质母细胞瘤细胞（G422）

小鼠脑神经胶质母细胞瘤细胞(G422)
细胞介绍
1964年建株；甲【jiǎ】基胆蒽植入【rù】Km小鼠【shǔ】脑【nǎo】内诱发星形细胞【bāo】瘤，传至【zhì】第120代后转为
胶质细胞瘤；瘤细胞【bāo】悬液【yè】同【tóng】系小鼠皮下【xià】、肌肉【ròu】、脑内移植【zhí】，成功率皆100%。肌肉【ròu】及【jí】脑内移植可形成较规律【lǜ】的移植性瘤株，存活时间脑内【nèi】型15.9±4.8天；肌肉型【xíng】20.3±6.6天。
 
细胞特性
1)来源：星形细胞瘤
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
细胞接受后的处理：
1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2.请先【xiān】在显微镜下确认细胞生长状态，去掉封【fēng】口膜并【bìng】将T25瓶置于37°C培养【yǎng】约 2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4.如果【guǒ】细胞长满（90%以上）请及时进行【háng】细胞传代，传代培【péi】养用6ml本公司附 带的【de】*培养【yǎng】基。
5.接到细【xì】胞【bāo】次日，请检【jiǎn】查【chá】细胞是否污染，若发现污染或疑似【sì】污染，请及时与我 们取【qǔ】得【dé】电联。
细胞用途：仅供使用。
 
小鼠脑神经胶质母细胞瘤细胞(G422)本公司的细胞培养操作规程，供参考
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备【bèi】DMEM培养基(DMEM，GIBCO)，90%;胎牛血【xuè】清，10%。
2. 培养条件【jiàn】：气【qì】相：空气【qì】，95%;二氧化碳，5%。温度【dù】：37°C，培养箱湿度为70%-80%。
3.冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏细胞：将含有lmL细胞悬液的冻存管迅速【sù】放入37°C水浴【yù】中（水面要低【dī】于冻存管【guǎn】盖【gài】部）摇晃解冻【dòng】，移入事先准备好的【de】含有4mL培【péi】养基【jī】的15ml离心管中混合均匀。在【zài】1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清【qīng】液，加【jiā】入lmL培养基后吹匀。然后将所有【yǒu】细【xì】胞悬【xuán】液移入含有5ml培养基的培养瓶中培【péi】养过夜。
第二天换液并检查细胞密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞9-22次。
力口2m丨消化液【yè】（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养【yǎng】瓶中，置于37°C培
养箱中消【xiāo】化9-22分【fèn】钟，然后【hòu】在【zài】显微镜下观察细胞【bāo】消化情况，若细胞大部分【fèn】变【biàn】圆并脱落，迅速【sù】拿回操作【zuò】台，轻【qīng】敲几下【xià】培养瓶后加入3ml此细胞的 培养基终止消化【huà】。
 轻【qīng】轻吹打后吸出，移【yí】入15ml离心【xīn】管中，在【zài】1000RPM条【tiáo】件【jiàn】下离心4分钟，弃去【qù】上清液，加入lmL培养液后吹匀。
移入到事先准备好的含有5ml培养【yǎng】基【jī】的T-25培养【yǎng】瓶中或含有14ml培养【yǎng】基【jī】的T-75培养【yǎng】瓶【píng】中培养。
细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻【dòng】存【cún】。贴壁细胞冻存时，先要消化处理【lǐ】并进行细胞【bāo】计数【shù】。消化【huà】方法按照细胞【bāo】传代方法的9-22步【bù】骤进【jìn】行，后的重悬液【yè】使用血清。悬浮【fú】细胞【bāo】直【zhí】接计数后离心，用血清【qīng】重悬浮，加DMSO至终【zhōng】浓度【dù】为10%。加入DMSO后迅速混【hún】匀【yún】，按每lml的【de】数量分配到冻存管【guǎn】 中。本【běn】公司按每个冻【dòng】存管细胞数目【mù】大于【yú】1X106个细胞【bāo】冻存。
 
小鼠脑神经胶质母细胞瘤细胞(G422)注意事项：
收到【dào】细胞后，若发现干冰【bīng】己挥发【fā】干净、冻存管瓶盖脱落、破损及【jí】细胞【bāo】有污染，请立即【jí】与我【wǒ】们电联。
所有【yǒu】动物【wù】细胞均视为【wéi】有潜在的【de】生物危害性，必须在二级生物安全台【tái】内操作，并请注【zhù】意【yì】防【fáng】护，所有废【fèi】液及接触过此细胞的【de】器皿需要灭【miè】菌后方能丢弃。