小鼠卵巢癌细胞（ID8）

小鼠卵巢癌细胞(ID8)
细胞特性
1)来源：小鼠卵巢癌组织
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
细胞接受后的处理：
1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2.请先在显微【wēi】镜下确【què】认细胞生【shēng】长状态，去【qù】掉封【fēng】口膜并将T25瓶置于37°C培养约【yuē】 2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4.如果细【xì】胞长满（90%以上）请【qǐng】及时进行细胞传【chuán】代，传代培养【yǎng】用6ml本公【gōng】司附带【dài】的*培养基。
5.接到细【xì】胞次日，请检查细【xì】胞是【shì】否污【wū】染【rǎn】，若发【fā】现污染或疑【yí】似污染，请及时与我【wǒ】们取得电联。
细胞用途：仅供使用。
 
小鼠卵巢癌细胞(ID8)本公司的细胞培养操作规程，供参考
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备DMEM培养基(DMEM，GIBCO)，90%;北美【měi】胎牛【niú】血清【qīng】，10%。
2.培【péi】养条件：气【qì】相：空【kōng】气，95%;二氧化碳，5%。温度：37°C，培养箱湿【shī】度为70%-80%。
3.冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
2)细胞处理：
复苏细胞：将含有lmL细胞【bāo】悬液的冻【dòng】存管迅【xùn】速放入37°C水【shuǐ】浴中【zhōng】（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备【bèi】好的含有4mL培【péi】养基的【de】15ml离心管【guǎn】中混合【hé】均匀。在1000RPM条件【jiàn】下【xià】离【lí】心【xīn】4分钟，弃去上清液，加入【rù】lmL培【péi】 养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入【rù】含有5ml培养基【jī】的培养瓶中培【péi】养过夜。 第二天换液并检查细【xì】胞密【mì】度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞9-21次。
力【lì】口2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中【zhōng】，置【zhì】于37°C培
养【yǎng】箱【xiāng】中消【xiāo】化9-21分钟，然后【hòu】在显微镜下观察细【xì】胞消化情况，若细胞大部分【fèn】变圆【yuán】并【bìng】脱落，迅速拿回操作【zuò】台，轻【qīng】敲几下培养瓶后【hòu】加入【rù】3ml此细胞的 培养基终止消【xiāo】化。
轻轻吹打【dǎ】后吸【xī】出【chū】，移入15ml离心管中，在1000RPM条件下离心4分【fèn】钟，弃去上清液，加入【rù】lmL培养【yǎng】液后吹匀。
移入【rù】到事先准备好的含【hán】有5ml培养基的T-25培养瓶中【zhōng】或含有14ml培养【yǎng】 基的T-75培养【yǎng】瓶中培养。
 
细胞【bāo】冻存：待细胞生长【zhǎng】状态良好时，可进行细胞冻存。贴【tiē】壁细胞【bāo】冻【dòng】存时，先要消化【huà】处理并【bìng】进行细胞计数。消【xiāo】化【huà】方法按照细胞传【chuán】代【dài】方法【fǎ】的9-21步骤进行，后的重悬液使用【yòng】血清【qīng】。加DMSO至终浓度为【wéi】10%。加入DMSO后【hòu】迅速混【hún】匀，按【àn】每lml的【de】数量分配到冻存管中。本公司【sī】按每个冻存管细【xì】胞数目大于 1X106个细胞冻存。
 
小鼠卵巢癌细胞(ID8)注意事项：
收到细胞后，若发【fā】现【xiàn】干冰己挥发干净【jìng】、冻存管【guǎn】瓶盖脱落【luò】、破损及细胞有污染， 请立即与【yǔ】我们电联【lián】。
所【suǒ】有【yǒu】动物细胞【bāo】均视为有【yǒu】潜在的生物【wù】危害【hài】性，必须在二级生物安【ān】全台内操作， 并请注意防护，所有废液及接【jiē】触过此【cǐ】细【xì】胞【bāo】的器皿需要灭菌后方【fāng】能丢弃。