小鼠结肠癌细胞（MC-38）

小鼠结肠癌细胞(MC-38)
细胞特性
1)来源：结肠癌
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
运输和保存：使用含【hán】有胎牛血清的2ml冻存管【guǎn】发送存活细胞。收【shōu】到【dào】细胞【bāo】后，可在1000RPM，常温条【tiáo】件下【xià】，离心【xīn】5min后，于洁净操作【zuò】台【tái】弃【qì】去上清，加入【rù】推荐使用的培【péi】养基后转移至【zhì】l〇cm培【péi】养皿或者T75培养瓶中培养，传代达到【dào】细胞生【shēng】长状态良好【hǎo】时，再进行冻存。具体【tǐ】操作见细胞培养步骤。
细胞用途：仅供使用。
 
细胞培养步骤
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 DMEM 培养基(DMEM，GIBCO)，90%;胎牛【niú】血清，10%。
2.培养条件：气相：空气【qì】，95%;二【èr】氧化碳，5%。温度【dù】：37摄氏度，培养箱【xiāng】 湿度为70%-80%。
3.冻存液：90%*培养基，10%DMSO,现用现配。液氮储存【cún】。
 
2)细胞处理：
复苏细胞：将含有【yǒu】lmL细胞悬液的冻存管在37°C水【shuǐ】浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培【péi】养基混合均【jun1】匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清【qīng】液，补加l-2mL培养基后【hòu】吹【chuī】匀。然后将【jiāng】所有【yǒu】细胞悬液加入【rù】培养瓶中培养过夜（或【huò】将细【xì】胞悬液加入【rù】l〇cm皿中，加入【rù】约8ml培养基【jī】，培【péi】养过夜【yè】）。第二天换液并检【jiǎn】 查【chá】细胞密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
小鼠结肠癌细胞(MC-38)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞9-21次。
力口2m丨消【xiāo】化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中【zhōng】，置于37°C培
养箱中消【xiāo】化9-21分钟【zhōng】，然后在显微镜【jìng】下观察细胞消化情【qíng】况，若细胞大部 分变圆【yuán】并脱落【luò】，迅速拿回操作台【tái】，轻【qīng】敲【qiāo】几下【xià】培养瓶后加【jiā】少【shǎo】量培养基终止消化。
按【àn】6-8ml/瓶补【bǔ】加【jiā】培【péi】养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条【tiáo】件下离心4分钟，弃去上清液【yè】，补加l-2mL培养液后吹匀。
将细胞悬【xuán】液按1: 2到1: 5的比例分到【dào】新的【de】含8ml培【péi】养基的【de】新皿中【zhōng】或者瓶中。
 
细胞冻存：待细【xì】胞生【shēng】长状态良好时，可【kě】进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时【shí】，弃【qì】去培【péi】养【yǎng】基后加入少量胰酶，细胞变【biàn】圆脱落【luò】后，加入约lml含血【xuè】清的【de】培养基后加【jiā】入冻【dòng】存【cún】管中，再【zài】添加1〇%DMSO后进行冻存。
 
小鼠结肠癌细胞(MC-38)注意事项：
收【shōu】到细【xì】胞后，若发现干冰己挥发干净、冻【dòng】存管【guǎn】瓶盖脱落、破损及细【xì】胞有污染，请立即【jí】与我们电联。
所有动【dòng】物细胞均视为有【yǒu】潜【qián】在的生物【wù】危害性，必须在二级生物安全台内【nèi】操作【zuò】，并【bìng】请注意防护【hù】，所有废【fèi】液及接触过此细胞的器皿需要灭菌【jun1】后方【fāng】能丢弃。