小鼠胃癌细胞 （MFC）

小鼠胃癌细胞 (MFC)
细胞特性
1)来源：小鼠胃癌
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
运输和保存：使用含有胎牛【niú】血清的2ml冻【dòng】存管发送存【cún】活细胞。收到细胞后，可在1000RPM，常温条件【jiàn】下【xià】，离心5min后，于洁净操作【zuò】台弃去上清，加入推荐 使用的培养【yǎng】基后转【zhuǎn】移至l〇cm培养皿或【huò】者【zhě】T25培养瓶中培养【yǎng】，传代达【dá】到细胞生长状态【tài】良【liáng】好【hǎo】时【shí】，再进行【háng】冻存。具体操作见细【xì】胞培养【yǎng】步骤。
细胞用途：仅供使用。
 
小鼠胃癌细胞 (MFC)细胞培养步骤
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准【zhǔn】备 RPIVM-1640培养基(RPIVM-1640:GIBCO,添【tiān】加NaHC031.5g八, D-葡萄糖【táng】2.5g八，丙酮【tóng】酸钠O.llg八)，90%;胎牛血清，10%。
2.培养【yǎng】条件：气相【xiàng】：空气，95%;二氧化【huà】碳，5%。温度：37摄氏【shì】度，培养箱 湿度为70%-80%。
3.冻存液：90%*培【péi】养基，10%DMSO,现用现【xiàn】配。液氮储【chǔ】存。 
2)细胞处理：
复苏【sū】细胞：将含有lmL细胞悬液的冻存管在37°C水浴中迅速摇晃解【jiě】冻，加入4mL培养基【jī】混合【hé】均【jun1】匀。在【zài】1000RPM条【tiáo】件下离心【xīn】4分钟，弃去【qù】上清液，补【bǔ】加l-2mL培养【yǎng】基后吹【chuī】匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液【yè】加入l〇cm皿中【zhōng】，加入【rù】约【yuē】8ml培养基，培养过夜）。第二天换【huàn】液并【bìng】检 查细【xì】胞密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞9-21次。
力【lì】口2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养【yǎng】瓶中【zhōng】，置于37°C培
养箱中【zhōng】消化9-21分钟，然后在显微镜下观察【chá】细胞消【xiāo】化情况，若细【xì】胞大部 分变【biàn】圆【yuán】并脱落，迅速【sù】拿回操作台，轻敲几下培【péi】养瓶后加【jiā】少量培养【yǎng】基终止消化。
按6-8ml/瓶补加培【péi】养基，轻【qīng】轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加l-2mL培养液后【hòu】吹【chuī】匀【yún】。
将细胞【bāo】悬液按1: 2到1: 5的比【bǐ】例【lì】分【fèn】到新的含8ml培养基的【de】新皿中或【huò】者瓶中。
 
细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行【háng】细【xì】胞冻存【cún】。贴壁细胞冻存时【shí】，弃去培养基后【hòu】加入少量【liàng】胰酶，细胞变圆脱落后，加入约lml含血清的培养【yǎng】基后【hòu】加入冻存管中，再添加1〇%DMSO后进【jìn】行冻存【cún】。
 
小鼠胃癌细胞 (MFC)注意事项：
收到细【xì】胞后，若发现干冰己【jǐ】挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有【yǒu】污染，请【qǐng】立即与【yǔ】我们【men】电联。
所有动物细胞均【jun1】视为有潜在的【de】生物危害性，必须【xū】在二级生物安【ān】全台【tái】内操作【zuò】，并请【qǐng】注【zhù】意防护，所有废液及【jí】接触过【guò】此细【xì】胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。