罗猴胎肾细胞（MA-104）

罗猴胎肾细胞(MA-104)
细胞介绍
MA 104细胞衍生于罗【luó】猴胎肾。细【xì】胞【bāo】对猴【hóu】轮状病毒（Simian rotavirus SA11)高度敏感【gǎn】。可用于很多病毒的增【zēng】殖。
 
细胞特性
1)来源：罗猴胚胎肾
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
运输和保存：可选择干冰运输及发送【sòng】复【fù】苏存活细【xì】胞方式：（1)干冰运【yùn】输，收到后立【lì】即转入液【yè】氮冻【dòng】存或直接复苏；（2)存【cún】活细胞，收到后应【yīng】继【jì】续生长，传代达到细胞生长状【zhuàng】态良好【hǎo】时，再【zài】进行存。具体【tǐ】操【cāo】作见细胞培养步骤【zhòu】。
 
罗猴胎肾细胞(MA-104)细胞用途：仅供使用。
细胞培养步骤
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 RPIVM-1640 培养基(RPIVM-1640:GIBCO,添加 NaHC031.5g八【bā】D-葡【pú】萄糖2.5g八，丙酮酸钠【nà】O.llg八)，85%;胎牛血【xuè】清，15%。
2.培养条件：气相：空气【qì】，95%;二【èr】氧化碳，5%。温【wēn】度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3.冻存液：90%*培养基，10%DMSO,现用现【xiàn】配。液氮储存【cún】。
 
2)细胞处理：
复苏细胞：将含【hán】有lmL细胞悬【xuán】液的冻存管在【zài】37°C水【shuǐ】浴【yù】中迅速摇晃解冻，加【jiā】入4mL培养基混合均匀。在【zài】1000RPM条件下离心4分【fèn】钟，弃去上清【qīng】液，补加l-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬【xuán】液加【jiā】入培【péi】养瓶中【zhōng】培养【yǎng】过夜【yè】（或【huò】将细【xì】胞【bāo】液加入l〇cm皿中，加入约8ml培养【yǎng】基，培养【yǎng】过夜）。第二天换液并【bìng】检查细胞密度。细胞【bāo】传【chuán】代：如果细胞密度达【dá】80%-90%，即可【kě】进【jìn】行传【chuán】代培养。弃去培养【yǎng】上【shàng】清，用不含钙、镁离子的PBS润洗【xǐ】细胞9-21次力【lì】口【kǒu】 2m丨消化（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培【péi】养瓶中，置于37°C培养箱中消【xiāo】化9-21分钟，然后【hòu】在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变【biàn】圆并脱【tuō】落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培【péi】养基终止消化。按6-8ml/瓶补加培养基，轻【qīng】轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分【fèn】钟，弃【qì】去上清【qīng】液，补加l-2mL培【péi】养液后【hòu】吹匀。将细【xì】胞悬【xuán】液【yè】按1: 2到1: 5的比【bǐ】例【lì】分到【dào】新的含8ml培养基【jī】的新皿中或者瓶中。
细胞冻存：待细胞生长【zhǎng】状【zhuàng】态良【liáng】好时，可进行细胞冻存。贴【tiē】壁细胞冻存【cún】时，弃去培【péi】养基后加入少量胰酶，细胞变【biàn】圆脱落【luò】后，加入【rù】约【yuē】lml含血清【qīng】的培养基后加入冻存【cún】管【guǎn】中【zhōng】，再添加1〇%DMSO后进【jìn】行冻存。
 
罗猴胎肾细胞(MA-104)注意事项：
收【shōu】到细胞后，若发现干【gàn】冰己挥发干【gàn】净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞【bāo】有污【wū】染，请立【lì】即与我们电联。
所有【yǒu】动【dòng】物【wù】细胞均视为有潜在的生【shēng】物危害性，必须在二级生物安全台内【nèi】操作，并请【qǐng】注意防护【hù】，所有废液及接触过此【cǐ】细胞的【de】器皿需要【yào】灭菌后方能丢弃。